复旦大学生化DNA的生物合成.pptx

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第三篇基因信息的传递
遗传信息流动方向-中心法则
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半保留复制模式的实验证明
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第十章复制
半保留复制:DNA进行复制时,双螺旋结构解开而成为两股单链,各自作为模板,用于合成新的互补链。子代细胞出现新的DNA双链,其中一股单链是从亲代完整地接受过来的,另一股单链是完全重新合成,且与母链按碱基配对原则互补。也就是说,两个子代细胞的DNA双链,都和母细胞DNA碱基序列完全一致。
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第一节参与DNA复制的酶
底物:脱氧三磷酸核苷
聚合酶:依赖DNA的DNA聚合酶
模板:解开成单链的DNA母链
引物:一段寡核苷酸
其它酶和蛋白质因子:起解链、理顺双螺旋、稳定单链的作用。连接酶。
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一、DNA聚合酶
大肠杆菌中有DNA聚合酶I,II和III。
PolIII被认为是原核生物细胞内真正起复制作用的酶。
PolI可以被蛋白酶分成大小片段,大片段有DNA聚合酶的活性,称为Klenow片段。
真核生物中发现的DNA聚合酶有、、和。
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DNA聚合酶催化的反应
5’到3’的聚合活性
(dNMP)n+dNTP(dNMP)n+1+Ppi
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DNA聚合酶催化的反应
5’到3’的聚合活性
(dNMP)n+dNTP(dNMP)n+1+Ppi
核酸外切酶活性(从5’或3’末端把核苷酸从核酸链上水解下来)
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DNA聚合酶的性质
以脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)为前体催化合成DNA
需要模板和引物
不能起始合成新的DNA链
催化dNTP加到生长中的DNA的3’-OH末端
催化DNA合成的方向是5’到3’。
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复制的保真性
DNA复制保真性至少依赖三种规律:
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