机体免疫功能的检测技术.ppt

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江文正
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第一节 免疫细胞的分离与纯化
第二节 体液免疫功能的检测
第三节 细胞免疫功能的检测
第四节 细胞因子及其受体的
检测技术
第九章 机体免疫功能的检测技术
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第一节免疫细胞的分离与纯化
一、白细胞的分离
二、外周血单个核细胞的分离
三、淋巴细胞及其亚群的分离
四、其他细胞的分离和收集
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一、白细胞的分离
血液中红细胞与白细胞比例约600~1000:1
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上层:淡黄色血浆
灰白层:白细胞
底层:红细胞
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室温静置30-60min
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某些高分子聚合物(如明胶、右旋糖酐、***纤维素和聚乙烯吡咯烷***等)可使红细胞凝聚成串,加速红细胞沉降,使之更易与白细胞分离。
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二、外周血单个核细胞的分离
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人外周血细胞的密度为:,,~,~。
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◆Ficoll分层液法即聚蔗糖-泛影葡***密度梯度离心分离法(ficoll-hypaquedensitygradientcentrifugation)
◆聚蔗糖密度:***密度:
◆外周血单个核细胞(PBMC)密度:
人:::
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用Ficoll分离外周血单个核细胞
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95%
2000rpm
20min
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◆Percoll是聚乙烯吡咯烷***包被的硅胶混悬液的商品名,为一种无细胞毒无刺激的新型密度梯度分层液。
◆Percoll原液()+%(9:1)
Percoll浓度(%)706050403020
比重(g/ml)
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