高三生物一轮复习 第2讲 微生物的培养与用分层训练.pdf

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中添加碳源去掉氮源。鉴别纤维素分解菌可用刚果红染色法,要鉴别尿素分解
(建议用时:45分钟)
菌,可在培养液中加入酚红指示剂。
A组基础达标)
【答案】(1)②1①→③→②(2)①碳源氮源②刚果红染色酚红指示
1.(2017·高三)如图是某细菌纯化培养过程中划线接种的培养结果。回答
剂
下列问题。
2.(2017·二模)我国规每升饮用水肠杆菌不能超过3个。某兴趣小组尝试
(1)在________(填图中编号)区域出现了单个菌落,产生每个菌落的最初细
对某品牌饮用水的大肠杆菌含量进行检测,操作简图如图甲,伊红美蓝培养基
菌数目是________个细菌。据图分析,在培养基上划线接种时,划线的顺序依
配方如图乙。
次是________(用编号表示)。
回答下列相关问题:
(2)下表是某微生物培养基成分。
(1)图滤膜的孔径____________(填“大于”或“小于”)大肠杆菌。受此启
编号成分含量编号成分含量
①粉状硫10g②(NH),对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌?___________________。
424
③KHPO4g④
244(2)配制图乙中的基础培养基时,除了水分、无机盐以外,还加入
⑤⑥
42
⑦HO100mL———
2____________(一种营养成分),以及____________。伊红美蓝培养基上生长的
①若培养从土壤中分离出来的自生固氮菌,该培养基添加________,去除
大肠杆菌菌落呈现黑色,从功能上划分,该培养基属于____________培养基。
________。
(3)该小组通过统计____________的数目,计算出单位体积样品肠杆菌数
②若要鉴别纤维素分解菌,可用________法,若要鉴别尿素分解菌,可在
目,理论上他们的统计值比实际值____________(填“偏高”或“偏低”),理
培养液中加入________。
由是______________________________________________________________
【解析】(1)从图中可知,②号区域出现了单个菌落;1个菌落最初是由1
______________________________________________________________。
个细菌形成;根据线条数量可判断,划线的顺序依次是①→③→②。(2)自生固
【解析】(1)为达到除菌的目的,图滤膜的孔径小于大肠杆菌。对某些不
耐高温的试剂可以用滤膜过滤除菌。行。
(2)配制图乙中的基础培养基时,除了水分、无机盐以外,还加入氮源,以(3)在培养20小时后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落,说明西瓜
及琼脂。伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色,从功能上划分,该的浸出液中有____________(填“一种”或“多种”)细菌。细菌总数越多,说
培养基属于鉴别培养基。明西瓜被细菌污染的程度越____________(填“高”或“低”)。
(3)该小组通过统计黑色菌落的数目,可计算单位体积样品肠杆菌数目,若【解析】(1)虽然培养微生物的各种培养基的具体配方不同,但一般都含
两个或多个大肠杆菌连在一起,平板上只能观察到1个菌落,因此理论上他们有水、碳源、氮源和无机盐。常采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。
的统计值比实际值偏低。(2)平板冷凝后,皿盖内侧会凝结水珠。将平板倒置,可以防止皿盖上的水
【答案】(1)小于用滤膜过滤除菌(2)氮源琼脂鉴别(3)黑色菌落偏珠落入培养基,造成污染。要观察细菌的种类和数量,需采用稀释涂布平板法。
低两个或多个大肠杆菌连在一起时,平板上只能观察到1个菌落为了避免周围环境中微生物的污染,需在酒精灯火焰旁进行接种。
,盖上保鲜膜后放入冰箱,是很多人日常储藏西瓜的(3)通过观察菌落的颜色、形状和大小判断微生物的种类,菌落种类越多,
办法。但事实上,有时候盖上保鲜膜储藏的西的细菌种类和数目反而比没用保说明微生物种类多;菌落数量多,说明西瓜被细菌污染的程度高。
鲜膜的多。某生物研究小组用保鲜膜保存三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液,【答案】(1)氮源无机盐高压蒸汽灭菌(2)倒置稀释涂布平板酒精灯
研究细菌的种类和数量。火焰(3)多种高
(1)该研究小组需配制用于培养微生物的培养基,配制的培养基一般都含有4.(2017·中学模拟)有机化工原料***苯不易降解,会污染环境,现欲从土
水、碳源、____________和____________。一般采用____________法对培养壤中分离高效降解***苯的微生物。回答下列问题:
基进行灭菌。(1)为了获得能降解***苯的微生物菌种,可在被***苯污染的土壤中取样,并
(2)为了避免培养基污染,在培养过程中,需将平板____________(填“正选用以____________为碳源的培养液进行选择培养。除含有碳源外,培养液还
置”或“倒置”)。为了观察浸出液中微生物的种类和数量,采用____________含有____________、无机盐和蒸馏水。
法接种。接种时,为了避免环境中微生物的污染,操作在____________附近进(2)将获得的3种待选微生物甲、乙、丙分别接种在1L含20mg***苯的相
同培养液中培养(培养液中其他营养物质充裕、条件适),观测从开始到微生物【答案】(1)***苯氮源(2)乙(3)显微镜稀释涂布平板>(4)原核核糖
停止生长所用的时间,甲、乙、丙分别为33小时、15小时、46小时,则选择体
微生物____________作为菌种进行后续培养。5.(2017·二模)牛奶中富含蛋白质,长期饮用有助于增强体质,但牛奶同
(3)若要测培养液中选菌种的菌体数,既可用____________直接计数,也可时也是多种疾病的传播载体。国家是每毫升牛奶中细菌数小于30000个。以下
选用____________法统计活菌数目,一般前者得到的结果____________(填是牛奶消毒及细菌检测。
“>”“=”或“<”)后者。(1)图中步骤①称为____________消毒法。步骤②是____________。
(4)对选的菌种进行细胞学检测,发现它没有具膜细胞器如线粒体,则该菌(2)培养基中的蛋白胨可以为微生物提供____________。进行步骤③操作
种属于____________生物,其产生的降解***苯的酶蛋白是在____________上合时,选用下列中的哪种工具?____________。为了避免杂菌污染,此步骤在
成。____________附近进行。
【解析】(1)筛选能降解***苯的微生物,需要使用以***苯为唯一碳源的选(3)将接种后的培养基和作为对照的__________________同时放入37℃
择培养基。除碳源外,培养液还含有氮源、无机盐和蒸馏水。恒温培养箱中,培养36小时。取出后统计各平板的菌落数,结果如下表所示。
(2)在三组中,乙组所用时间最短,说明降解***苯的能力最强,所以选择乙该选择其中稀释倍数为____________的平板进行计数,经过消毒后的牛奶中,
组中的微生物作为菌种进行后续培养。细菌数大约是____________/mL。
(3)测培养液中选菌种的菌体数,既可以在显微镜下用血细胞计数板(显微牛奶稀释倍数102103104
平板1菌落数87101
镜直接计数法)或稀释涂布平板法进行计数。前者计数包括培养液中的死亡的细
平板2菌落数83121
胞,后者是活菌计数,且菌落可能是由2个或多个细胞形成,所以前者得到的平板3菌落数85100
【解析】(1)80°C恒温水浴15min是巴氏消毒法,步骤②是进行稀释(或
结果偏大。
梯度稀释)。
(4)对选的菌种进行细胞学检测,没有具膜的细胞器,则该菌种属于原核生
(2)培养基中的蛋白胨可以为微生物提供碳源、氮源(和维生素),③是接种,
物,其产生的降解***苯的酶蛋白是在核糖体上合成的。
因为需要计数,需用稀释涂布平板法,接种工具是涂布器;为了避免杂菌污染,【解析】(1)在样品稀释和涂布平板过程中,需要在酒精灯火焰附近进行
此步骤在酒精灯火焰附近进行。操作,培养皿用于盛放培养基并培养细菌,无菌水做稀释的溶剂,此处唯一用
(3)统计各平板的菌落数时,选择菌落数在30~300的计数×经过消毒后的不到的是显微镜。
牛奶中,细菌数大约是(87+83+85)÷3×102=8500个。(2)在涂布平板时,要取少量菌悬液滴加到培养基表面,因为如果滴加菌悬
【答案】(1)巴氏稀释(或梯度稀释)(2)碳源、氮源(和维生素)B酒精液量过多,菌悬液就会堆积在培养基表面影响分离效果。
灯火焰(3)一个未接种的培养基1028500个(3)在向试管内分装含琼脂的培养基时,如果试管口粘附有培养基,就很容
,可用来发酵处理秸秆,提高秸秆的易使棉塞受到污染,因此,需要用无菌的酒精棉球将试管口擦拭干净。
营养价值。为了增强发酵效果,研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株,并(4)因为刚果红可以与纤维素形成复合物,且不与纤维素降解产物反。所以
对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题:在刚果红培养基平板上,菌落周围有透明降解圈是纤维素被降解的结果,降解
(1)在样品稀释和涂布平板步骤中,下列选项不需要的是______(填序号)。圈大小由纤维素酶的活性和量决。图中菌落①周围的降解圈最大,因此其降解
①酒精灯②培养皿③显微镜④无菌水纤维素的能力最强。
(2)在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌悬液量不过多的原因是【答案】(1)③(2)培养基表面的菌悬液会出现积液,导致菌体堆积,影
______________________________________________________________。响分离效果(3)避免培养基污染棉塞
(3)向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口粘附有培养基,需要用酒精(4)量与活性①
棉球擦净的原因是__________________________________________。7.(2017·高三模拟)某些农作物秸秆富含纤维素,纤维素经过水解可以形
(4)刚果红可以与纤维素形成复合物,但并不与纤维素的降解产物纤维二糖成葡萄糖,葡萄糖再经过发酵可以生产酒精。如图是利用农作物秸秆生产酒精
和葡萄糖发生这种反。研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降的大致流程,请回答下列问题:
解圈的菌落(见下图)。图中降解圈大小与纤维素酶的__________有关。图中降――→――→
预处理、水解葡萄糖发酵
解纤维素能力最强的菌株是______(填图中序号)。
(1)农作物秸秆含有丰富的纤维素,纤维素要经过纤维素分解菌分解成葡萄酵母菌在酒精发酵时一般将温度控制在18~25℃;发酵后是否有酒精产生,
糖。人们常常是从土壤中分离纤维素分解菌。分离纤维素分解菌常用的方法是可以用酸性***钾来检验。
__________。其流程是:土壤取样―→选择培养―→________―→将样品涂布到(4)醋酸菌与酵母菌在代谢类型上的区别是:醋酸菌是好氧型的,酵母菌是
鉴别纤维素分解菌的培养基上―→挑选产生的________菌落。兼性厌氧型。
(2)纤维素分解菌能合成纤维素酶,纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至【答案】(1)刚果红染色法梯度稀释透明圈(2)C酶、C酶、葡萄糖苷
1X
少含有三种组分,即______________。前两种酶使纤维素分解成________,第酶纤维二糖(3)18~25℃(酸性)***钾(4)醋酸杆菌是好氧型的,酵母菌
三种酶将它分解成葡萄糖。是兼性厌氧型
(3)图中发酵阶段常用的菌种是酵母菌,在酒精发酵时一般将温度控制在B组能力提升
________。发酵后是否有酒精产生,可以用________来检验。,炭疽杆菌两端截平、
(4)利用葡萄能生产果酒,进而生产果醋,生产果醋常用的菌种是醋酸菌,呈竹节状排列,菌落呈卷发状,对炭疽病疑似患者,可根据噬菌体的宿主专一
醋酸菌与酵母菌在代谢类型上的区别是______________________________。性,通过确诊。
【解析】(1)刚果红能与纤维素形成复合物,而刚果红对纤维二糖和葡萄①细菌培养:采集疑似患者的样本,分离培养,获得可疑菌落。
糖无此作用,分离纤维素分解菌常用的方法是刚果红染色法,其流程是土壤取②细菌鉴:流程如图所示。
样―→选择培养―→梯度稀释―→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基(1)挑选可疑菌落制片后,用____________观察,可看到呈竹节状排列的杆
上―→挑选产生透明圈的菌落。菌。
(2)纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少含有三种组分,即C酶、C(2)所用液体培养基的碳源为____________(填“无机碳”或“有机碳”)。
1X
酶、葡萄糖苷酶,其中的C酶和C酶使纤维素分解成纤维二糖,葡萄糖苷酶将(3)接种可疑菌落后,35℃培养24h,液体培养基变浑浊,原因是
1X
纤维二糖分解成葡萄糖。____________,对照组试管中加入____________,与组同时培养6h后,若组
(3)温度是酵母菌生长和发酵的重要条件,20℃左右最适合酵母菌繁殖,液体培养基的浑浊度比对照组____________(填“高”或“低”),则可明确疑
似患者被炭疽杆菌感染;反之则排除。____________主要提供有机磷。从土壤中富集解磷微生物时,选用
(4)对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相____________(填“固体”或“液体”)培养基。
抗体。与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外,还有____________和(2)在倒平板前,对玻璃器皿和培养基灭菌,灭菌方法是____________。配
____________。制成10-1浓度稀释液时,用无菌移液管从富集液的上清液中吸取1mL,移入盛
【解析】(1)炭疽杆菌是原核生物,为单细胞生物,观察它的结构借助显有____________mL无菌水的试管中,并依次配制10-2~10-10的梯度稀释液。
微镜。(2)所用培养基的碳源为有机碳,因为炭疽杆菌为异养型微生物。(3)35℃(3)分析菌种的分离纯化结果,选择____________号菌落进行扩大生产,原
培养24h,细菌大量繁殖会导致液体培养基变浑浊,对照组不能含有细菌,根因是___________________________________________________。
据量原则故该加入量的生理盐水,组加入噬菌体液后,由于噬菌体能够使炭疽【解析】(1)卵黄液中含有磷脂较多,因此主要提供有机磷的物质是无菌
杆菌死亡,故组液体培养基的浑浊度比对照组低。(4)抗体是由体液免疫过程产卵黄液。微生物的富集培养最好用液体培养基,这有利于微生物与培养基的接
生,参与体液免疫的细胞有T细胞、B细胞、吞噬细胞、浆细胞。触,充分利用培养基中的营养物质。(2)玻璃器皿和培养基的灭菌通常用高压蒸
【答案】(1)显微镜(2)有机碳(3)细菌大量繁殖量的生理盐水低(4)汽灭菌,玻璃器皿也可以单独用干热灭菌法灭菌。进行梯度稀释时,配制成10
吞噬细胞浆细胞-1浓度稀释液时,用无菌移液管从富集液的上清液中吸取1mL,移入盛有9mL
,可降低水体富营养化程度。下图是从湖泊污无菌水的试管中。(3)由表可知,3号菌落透明圈直径/菌落直径最大,由于透
泥中筛选解磷微生物的过程示意图,下表是分离纯化的结果。请回答下列问题:明圈直径/菌落直径与微生物的解磷能力呈正相关,说明3号菌落的微生物解磷
记录项目:透明圈直径/菌落直径能力最强,可以进行扩大生产。
菌落编号123【答案】(1)无菌卵黄液液体

(2)高压蒸汽灭菌9

(3)33号菌落透明圈直径/菌落直径最大,解磷能力强(3号菌落具有相对
(1)培养基的成分主要有牛肉膏、蛋白胨、NaCl及无菌卵黄液,其中
较大的透明圈,解磷能力强)