疟原虫血片制作及染色.ppt

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血膜制作
血膜染色
影响染色效果的因素
主要内容
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血膜制作(血膜分类)
用于检查疟原虫的血涂片有两种:一种是将血液涂呈薄膜状,称薄血膜;一种是血液涂成圆盘状,称厚血膜。厚血膜上的血细胞是重叠堆积在玻片上面,而薄血膜上的血细胞则要求平辅在玻片上面。
门诊或现场发热病人血片
标本片
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厚血膜
用血量约为4μl~5μl,~1cm的厚血膜,由于在制备过程中红细胞已溶解,疟原虫在形态上仍可分辨,但胞浆和胞核不可避免地形成一定程度的固缩。受影响较大的有大、裂殖体的形态。
由于厚血膜与薄血膜相比血量大,须查范围小,节省时间,阳性检出率较高。厚血膜能查出疟原虫数是薄血膜的15~25倍。所以,我们推荐疟疾诊断(门诊检验及现场普查)应以检查厚血膜为主。
厚、薄血膜的优缺点及其适用范围
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薄血膜
用血量约为1-,涂制成2cm宽×。由于在制备过程中,血片通常经甲醇固定,使红细胞及其内疟原虫的形态保持完整,适用于对疟原虫虫种的鉴定。
由于用血量少,为保证检测的敏感性,常耗时较多,不适用于大规模调查。特别在医院的检验室,由于要求在短时间内作出诊断,因而极有可能出现漏诊。
厚、薄血膜的优缺点及其适用范围
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血膜制作(取血时间)
取血时机现症病人一般可随时取血,疟疾普查时可不考虑取血时机。但在诊断或需要某期疟原虫作标本时,则应掌握适宜的取血时机。
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血膜制作(取血时间)
间日疟
前驱期相当于肝内期疟原虫发育,因原虫密度太低,镜检多为阴性。
发冷(寒战)期相当于红内期成熟裂殖体涨破红细胞期,镜检多为裂殖体和环状体。
发热期外周血中以环状体(小滋养体)为主,也可见到裂殖体;
出汗期因原虫密度太低,镜检多为阴性。
发作后数小时,间歇期外周血中以大滋养体为主,形态较易辩认,为诊断的有利时机;
发作36-48h,可检出裂殖体;
发作1-2次后,配子体出现较多。
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血膜制作(取血时间)
恶性疟较理想的取血时间是在发作后至20h内取血,发作后2小时左右,此时环状体发育至最高峰,初发患者退热后常查不到原虫。末梢血血检到恶性疟原虫配子体,是在末梢血出现环状体之后的7-10天。
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血膜制作(工具准备)
一次性采血针、75%酒精、棉棒(球),载玻片,推片,记号笔或铅笔。
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血膜制作(取血操作)
取血方法采血部位一般人为耳垂,指头,通常在耳垂取血。先用75%酒精棉球消毒取血部位(冬季用手捻动耳垂使其充血后再行消毒),待酒精干后,用左手拇指和食指紧捏耳垂上方,右手持消毒采血针(一人一针,避免血传疾病)迅速刺入耳垂下端1~2毫米,不宜过深或过浅。然后用右手中指轻轻向上挤压出血。
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