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文档列表
文档介绍
组织总RNA抽提
交大医学院检验系生化教研室
陈宁
RNA简介
RNA
腺嘌呤(A)
尿嘧啶(U)
胞嘧啶(C)
鸟嘌呤(G)
四种核苷酸串联组成的单链。
A-U
G-C
DNA
胸腺嘧啶(T)
RNA的主要类型有三种:
信使RNA(mRNA) 转录DNA上的遗传信息
核糖体RNA(rRNA) 与蛋白质结合形成核糖体,形成细胞内蛋白质合成的场所
转移RNA(tRNA) 运输被激活的氨基酸,翻译mRNA上的氨基酸序列
真核细胞中还存在
不均一RNA (hnRNA)
小核RNA (snRNA)
tRNA
mRNA与蛋白质的表达具有关联性。
控制生物性状的基本单位是基因,而生物性状的表达则主要通过蛋白质。
研究发现,所有基因均先转录成mRNA,再翻译成蛋白质。
生物遗传中心法则
细胞内RNA转录过程
与RNA有关的研究方法
RT-PCR
mRNA通过RT-PCR(逆转录-PCR),可建立相应cDNA文库
RNA序列分析
潜在基因分析
Northern 杂交
用于真核细胞中RNA表达和大小的检测分析(RNA-DNA探针)
RNA干扰技术(RNAi)
通过双链小干扰RNA(siRNA)的形成,诱导同源mRNA降解
组织RNA的抽提和纯化
RNA质量的标准
完整性—避免外源性及内源性RNase对RNA的降解
均一性—有效去除抽提过程中残留的DNA、蛋白质和有机溶剂
组织RNA抽提纯化方法
TRIzol试剂抽提法
利用含异硫氰酸胍成分的TRIzol破碎组织细胞,并抑制细胞释放的核酸酶。
硅胶膜纯化柱抽提法
硅胶膜纯化柱能迅速特异地吸附样品裂解液中的RNA,无需酚氯仿抽提,不用乙醇等沉淀,只须不断洗脱即可得到高纯度的RNA。
交大医学院检验系生化教研室
陈宁
RNA简介
RNA
腺嘌呤(A)
尿嘧啶(U)
胞嘧啶(C)
鸟嘌呤(G)
四种核苷酸串联组成的单链。
A-U
G-C
DNA
胸腺嘧啶(T)
RNA的主要类型有三种:
信使RNA(mRNA) 转录DNA上的遗传信息
核糖体RNA(rRNA) 与蛋白质结合形成核糖体,形成细胞内蛋白质合成的场所
转移RNA(tRNA) 运输被激活的氨基酸,翻译mRNA上的氨基酸序列
真核细胞中还存在
不均一RNA (hnRNA)
小核RNA (snRNA)
tRNA
mRNA与蛋白质的表达具有关联性。
控制生物性状的基本单位是基因,而生物性状的表达则主要通过蛋白质。
研究发现,所有基因均先转录成mRNA,再翻译成蛋白质。
生物遗传中心法则
细胞内RNA转录过程
与RNA有关的研究方法
RT-PCR
mRNA通过RT-PCR(逆转录-PCR),可建立相应cDNA文库
RNA序列分析
潜在基因分析
Northern 杂交
用于真核细胞中RNA表达和大小的检测分析(RNA-DNA探针)
RNA干扰技术(RNAi)
通过双链小干扰RNA(siRNA)的形成,诱导同源mRNA降解
组织RNA的抽提和纯化
RNA质量的标准
完整性—避免外源性及内源性RNase对RNA的降解
均一性—有效去除抽提过程中残留的DNA、蛋白质和有机溶剂
组织RNA抽提纯化方法
TRIzol试剂抽提法
利用含异硫氰酸胍成分的TRIzol破碎组织细胞,并抑制细胞释放的核酸酶。
硅胶膜纯化柱抽提法
硅胶膜纯化柱能迅速特异地吸附样品裂解液中的RNA,无需酚氯仿抽提,不用乙醇等沉淀,只须不断洗脱即可得到高纯度的RNA。
组织总RNA抽提 来自淘豆网www.taodocs.com转载请标明出处.
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