生化试剂参数.ppt

生化试剂各机型参数确定
目录
生化试剂主要参数及意义
生化试剂其他参数及意义
各机型生化分析仪概括介绍
各机型参数特点
生化试剂主要参数及意义
生化试剂说明书中各参数(例:脂肪酶)
项目名称
方法类型
反应方向
测定波长
测定温度
样本体积
试剂量
分析时间
校正方法
生化试剂主要参数及意义
项目名称(test name):
常以项目的英文缩写来设置。
方法类型(assay/Method )(适用于仪器的方法):
方法类型主要分为:终点法和动力学法
终点法
一点终点法:样本与试剂混匀一定时间后读取反应终点吸光度,如血糖氧化酶法、总蛋白双缩脲法、白蛋白溴甲酚绿法等。
两点终点法:(又称固定时间法)样本与试剂混匀一定时间后先读取吸光度A1,延迟一定时间后读取吸光度A2,计算吸光度差值与标准比较求得结果。如肌酐苦味酸法等。可消除内源性物质干扰。
生化试剂主要参数及意义
动力学法
一级动力学法:(两点速率法)样本与试剂反应不断消耗反应物,反应速度不断减小,吸光度变化不断减小,在特定时间段内进行监测,该时间段内吸光度升高或降低与样本浓度成正比,如同型半胱氨酸、总胆汁酸等。
零级动力学法:(连续监测法,用于酶活性监测)样本与试剂反应,反应物可匀速生成某个产物,如NADH,在特定波长下吸光度均匀的增大或减小,增大或减小的速度与样本浓度呈正比。如碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶等。
生化试剂主要参数及意义
一级动力学法:(两点速率法)
生化试剂主要参数及意义
零级动力学法:(连续监测法,用于酶活性监测)
生化试剂主要参数及意义
反应方向(response direction)
正向反应(UP/INC/+):吸光度增加。
负向反应(DOWN/DEC/-):吸光度下降。
测定温度
30℃、37℃、25℃
样本体积(sample volum)
一般为2-35μl ,。
试剂量(regengt volum)
一般为20-300μl ,以1μl步进。
不同机型生化分析仪的样本量及试剂量限制不同,样本与试剂可根据比例进行增大或减少。
生化试剂主要参数及意义
测定波长(wavelength):
不同生化分析仪具备不同的波长。可选择单波长或双波长。
主波长(main wavelength/primary wavelength )
根据待测物质在特定波长下具有最大吸收峰来选择主波长。
副波长(次波长sub wavelength/second wavelength )
可不选择设定。副波长可消除样本溶血,血清浑浊的干扰影响,副波长与主波长越接近越好。
检测时吸光度值为主波长的吸光度减去副波长的吸光度。
生化试剂主要参数及意义