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9 第9章酶免疫技术幻灯片.ppt

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文档列表 文档介绍

第九章酶免疫技术
第一节酶免疫技术的特点
一、酶和酶作用底物
二、酶标记抗体或抗原
三、固相载体
第二节酶免疫技术的分类
一、均相酶免疫测定
二、非均相酶免疫测定
第三节酶联免疫吸附试验
一、基本原理
二、方法类型及反应原理
思考题
小结
基本要求
1、掌握:酶免疫技术的特点和分类
2、掌握:酶联免疫吸附试验
3、掌握:酶免疫测定的应用
4、了解:膜载体的酶免疫测定及应用
放射免疫技术
发光免疫技术
酶免疫技术
三大经典标记技术
三大经典标记技术
第一节酶免疫技术的特点
主要试剂:
酶标记的抗体或抗原
酶标物特点:
免疫学活性
酶对底物的催化活性
抗原抗体反应的特异性
+
酶高效催化反应的专一性
原理及特点
特点:
灵敏度高、特异性强、准确性好
酶标记试剂能够较长时间保持稳定
操作简便、对环境没有污染。
易与其它技术偶联
衍生出适用范围更广的新方法。
原理:
酶标抗体(抗原)与抗原(抗体)的特异性反应
酶对底物的显色反应
对抗原或抗体进行定位、定性或定量的测定分析
原理及特点
辣根过氧化物酶(HRP)
糖蛋白(主酶)
亚铁血红素(辅基)
主酶与酶活性无关
辅基是酶的活性中心
RZ值:403nm (辅基) 与275nm(主酶) OD值之比
RZ值与酶活性无关,酶活性单位比RZ值更为重要
ELISA中应用最为广泛的标记用酶
常用酶
酶和酶作用底物
碱性磷酸酶(AP)
菌源性AP
肠粘膜AP
β–半乳糖苷酶(β-Gal)
用于均相酶
免疫测定
常用酶
酶和酶作用底物

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