现代生化仪器分析试题及答案.pdf

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只包含一种频率成分的光叫单色光,光谱分析中利用色散原理来获得单色光。,气相色谱仪一般由哪几部分组成及其作用?答:气相色谱仪的分离原理:当混合物随流动相流经色谱柱时,与柱中的固定相发生作用(溶解、吸附等),由于混合物中各组分理化性质和结构上的差异,与固定相发生作用的大小、强弱不同,在同一推动力作用下,各组分在固定相中的滞留时间不同,从而使混合物中各组分按一定顺序从柱中流出。气相色谱仪一般由气路系统、进样系统、分离系统、检测系统和记录与数据处理系统组成。1)路系统的作用:为色谱分析提供纯净、)进样系统的作用:进样并将分析样品瞬间汽化为蒸气而被载气带入色谱柱。3)分离系统的作用:使样品分离开。4)检测系统的作用:把从色谱柱流出的各个组分的浓度(或质量)信号转换为电信号。5)记录与数据处理系统的作用:?各有何作用?答:原子吸收光谱仪主要由光源、原子化器、分光系统、检测系统四大部分组成。1)源的作用:发射待测元素的特征谱线。2)原子化器的作用:)分光系统的作用:把待测元素的分析线与干扰线分开,使检测系统只能接收分析线。4)检测系统的作用:把单色器分出的光信号转换为电信号,经放大器放大后以透射比或吸光度的形式显示出来。:..PCR技术有哪些特点?1)高度的特异性:引物的限定,高温扩增。2)高度的敏感性:微量样品(单拷贝基因、单个细胞、一根头发等),高效性(×106)。3)操作简便快速,易于自动化、程序化,方法稳定。4)对标本的纯度要求底:纯化或粗制的,新鲜或陈旧的,各种细胞,体液,完整的或降解的DNA。?利用从光源辐射出的特征谱线被火焰原子化器产生的样品蒸气中的待测元素基态原子所吸收;通过测定特征辐射光被吸收的大小,。什么是仪器分析?它与化学分析方法比较有什么特点?仪器分析是指采用比较复杂或特殊的仪器设备,通过测量物质的某些物理或物理化学性质的参数及其变化来获取物质的化学组成、成分含量及化学结构等信息的一类方法。这些方法一般都有独立的方法原理及理论基础。仪器分析的特点(与化学分析比较):1)灵敏度高,、mg级降低到仪器分析的g、L级,甚至更低。适合于微量、痕量和超痕量成分的测定。2)选择性好。很多的仪器分析方法可以通过选择或调整测定的条件,使共存的组分测定时,相互间不产生干扰。3)操作简便,分析速度快,容易实现自动化。4)相对误差较大。化学分析一般可用于常量和高含量成分分析,准确度较高,误差小于千分之几。多数仪器分析相对误差较大,一般为5%,)需要价格比较昂贵的专用仪器。10。琼脂糖凝胶电泳的原理是什么?1))电泳缓冲液中充满了离子,因而导电,DNA分子在PH7~8时带负电,)琼脂糖凝胶中含有密集细小的孔洞,线状的DNA分子可以通过.:..4DNA分子越大,阻力越大,泳动越慢,经过一定时间泳动后将按大小排列成一组“条带。五、论述题简述一个PCR反应需要哪些试剂与试样及常规PCR的反应条件?答:1、反应需要的试剂:模板核酸(template如:人基因组DNA0。)扩增引物(primer一对,各0。2~1μmol/L)TaqDNA聚合酶(2。5U)dNTP(四种:各20~200μmol/L)标准的缓冲液:10Xbuffer(KCl、Tris-HCl、MgCl2、BSA或DDT)无菌双蒸水或三蒸水石蜡油或矿物油:30~50μl(封闭、防止高温时液体的挥发)2、反应条件预变性:94℃300s(高温起动:充分变性,防止非特异性扩增)变性:90℃-95℃,30s—60s退火:55—65℃30s—45s延伸:70—72℃30-60s(<2kb)25—35次cycle后,延长延伸(72℃,10min;充分延伸),冷却至4℃或加入EDTA至10mmol/L以终止反应。