补体溶血实验报告(共4篇).docx

补体溶血实验报告(共4篇) 实验三补体溶血实验一、实验目的:了解溶血反应的原理,掌握溶血反应的基本操作方法二、实验原理:将绵羊红细胞做抗原注射家兔体内,经一定潜伏期,家兔血清中即出现特异性抗体,此种抗体称溶血素,它可以与绵羊红细胞结合,此时若加入补体,即可激活补体的经典途径,则呈现溶血现象。三、实验材料 1、溶血素作为指示剂,来判定媒质中有无游离的补体,近而推定媒质中未知抗原和已知抗体是否进行了特异性的结合。本反应具有很高的敏感性及特异性,因之常应用于传染病的诊断,特别诊断病毒疾病和梅毒。由于参与本反应的各种成分间有着一定量的关系,因此在作本试验之前,必须通过一系列的预备实验来确定各成分的使用量,故本反应的实验方法较为复杂。本次实验以伤寒杆菌免疫血清与其相对应的抗原补体结合试验为例。材料: :::豚鼠血清 :%绵羊红血球 、试管架、水浴锅。方法: 预备试验预备试验包括溶血素效价的滴定,补体效价的滴定,抗原效价的滴定及被检血清的处理。溶血素效价的滴定按照下表加入各物凡最高稀释度的溶血素可呈现完全溶血者为一个单位。依上表结果第10管毫升溶血素为一个单位,在溶血反应中常用毫升中含有2个溶血素单位的溶液,所以试验时应取1:XX倍稀释的溶液。补体单位滴定能引起完全溶血的最小补体量称为准确单位,上表中第3管,但因补体的效价可能有部分损失,故普通稍高的一管为实用单位,实际试验时须用两个实用单位。上表的结果为:补体标准单位:毫升补体实用单位:毫升补体两个实用单位:毫升因试验时是两个实用单位的补体毫升,可依下列比例关系换算:20:=ⅹ:ⅹ= 即须将补体稀释倍,用毫升则含有两个实用单位。抗原的滴定在用已知抗原测定未知抗体时,必须先滴定抗原效价以决定本试验时所需抗原的最适如血清对照管呈完全或部分不溶血是为抗补体现象。血清严重污染细菌,混有淋巴液或显著溶血时,常产生很强抗外体作用。又如试管、吸管不清洁,也可出现抗补体。若有抗补体发生,应抽血重试验。补体的溶血反应原理: 当红细胞与相应抗体相结合,在电解质存在时,可使红细胞产生凝集现象;若同时加入新鲜动物血清,则血清中的补体可与红细胞及其抗体形成的免疫复合物结合,从而激活补体导致红细胞溶解,产生溶血现象材料 1、抗原:2%绵羊红细胞。 2、抗体:溶血素。 3、补体,新鲜豚鼠血清。 4、生理盐水。 5、小试管、刻度吸管、试管架、37℃水溶箱等。步骤 1、取小试管3支,编号后按下表加入各物管号2%红血球溶血素(2单位)补体(2单位)生理盐水1 2 -3- 2、将试管摇匀后置37℃水箱内:15—30分钟,取出观察有无溶血现象; 结果观察管底无血球沉淀,液体红色透明管为溶血。注意事项不要摇荡试管,红细胞离开机体是很容易破裂的。加样一定要精确,不要漏加附件13级护理本科补体溶血反应实验物品采购(转载于:写论文网:)及具体安排。级护理本科班人数分别为62、64人实验课时2学时实验分组,每班分12组,每组5-6人 : %溶液 ,共8只 ,加示教6只,共82管实验一补体结合实验实验原理:补体无特异性,可与任何