葡萄高温胁迫对水杨酸诱导的蛋白激酶活性的影响.pdf

摘要本研究以葡萄品种克瑞森无核()二年生扦插苗为试材,分三组处理,第一组,在25℃条件下,喷施水杨酸(SalicylicAcid,SA)浓度为150I_tmol·L~,30min后取样,并以喷施蒸馏水为对照(CK);第二组,在45℃高温处理30min,并以25℃为对照:第三组,喷施SA浓度为1501amol·L-1后,在45℃高温下处理30min后取样,并以喷施蒸馏水后45℃处理30rain为对照(CK)。采用体外底物磷酸化方法对三组处理的葡萄叶片中蛋白激酶的活性进行了测定,探讨三组处理对葡萄叶片蛋白激酶活性的影响,为迸一步研究SA、高温引起的葡萄植株体内的信号转导提供依据。试验结果表明,三组处理均激活了葡萄叶片中能将底物MBP磷酸化的蛋白激酶,当MBP(myelinbasicprotein)·ml’1时,三组处理的蛋白激酶活性达到最大值,而后,随底物浓度的增加,活性丌始出现下降趋势。,即使反应体系中有Ca2+存在时,蛋白激酶活性仍然没有提高,因此可以初步表明此蛋白激酶不是CDPK家族中的成员。在以MBP为底物的反应体系中,ATP浓度为50}Lmol·L。时,蛋白激酶活性活性最高,当ATP浓度为70岬ol·Lo时,蛋白激酶活性下降到最低点;反应时问以10min为宜,反应10min时,三组处理(水杨酸处理、高温处理、交叉处理)、,随着时间的增加,蛋白激酶的活性丌始迅速下降;M矛+浓度以5mmol·L.‘时,三组处理的蛋白激酶活性最高。c2+对三组处理激活的蛋白激酶活性的影响很弱,其浓度变化对蛋白激酶活性也无显著影响。在不同Mn2+浓度的反应体系中三组处理激活的蛋白激酶活性与对照没有显著性差异。关键词:葡萄叶片;高温胁迫;水杨酸;蛋白激酶活性;AbstractTwo—year—oldgrapeplants()·L。‘concentrationofSalicylicacidat25℃;andthensprayeddistilledwaterascontrol(CK).Theexperimentalmaterialsofthesecondgroupwastreated30minafterthesamplingat45℃conditions;andthenat25℃·L-‘wastreated30minat45*(2conditionsafterthesampling;andthensprayeddistilledwaterafterat45℃conditionsthetreatmentascontrol(CK).Theactivityofproteinkinaseingrapeleavesafterthethreeexperimentswasmeasuredthroughsubstratephosphorylationinvitro,,