橄榄酚类化合物分离纯化和结构的研究.pdf

中文摘要橄榄酚类化合物的分离纯化和结构研究中文摘要橄榄(CanaritanalbwnL.)为我国珍贵的药食两用资源,具有解酒护肝、抗菌消炎、抗病毒和解毒等药理功效,橄榄中酚类化合物是其主要的药效成分,但国内外有关橄榄酚类化合物组成的研究报道不多。本论文对我国橄榄果实中的酚类化合物进行提取、分离和纯化,并对酚类化合物单体的化学结构进行鉴定研究,以明确橄榄酚类的具体组成,对于橄榄资源的深加工利用和橄榄中药的药理研究具有重要的指导意义和应用价值。首先采用化学和仪器分析方法对福建闽侯檀香橄榄果实不同部分的化学组成进行了分析测定,结果表明,,,可溶性糖含量分别为蔗糖635mg/1009、果糖232mg/1009、葡萄糖52mgJlOog、稿子糖30mg/1009和麦芽糖7mg/1009,有机酸含量分别为苹果酸537mg/1009、柠檬酸64m∥loog、酒ii酸34m∥loog,奎宁酸28m∥1009、草酸24mg/1009、富马酸14me,/1009和乙酸1lmg/1009,由改良Folin-∥lOOg,高于地中海油橄榄和普通水果,而橄榄核中酚类含量较低(∥1009);%,蛋白中氨基酸种类齐全,橄榄核仁油不饱和脂肪酸相对含量为73_3%.核仁中钙、铁等矿物元素丰富。橄榄核仁资源具有很好的开发利用前景。采_【}j溶剂浸提法、超声波辅助提取和微波辅助提取方法对橄榄果肉中的酚类化合物进行了提取研究,-70%(V/V)***溶液,但在实际工业应用中以60%(Ⅵ,v)乙醇溶液为宜,~30℃,同液比1:20。提取次数2次;超卢辅助提取的最适功率为80W,虽佳提取时间25rain:微波辅助提取的最适功率为340W,提取时间为30s。三种提取方法的酚类得率差别不显著(P>),提取物酚类组成基本相同,提取率均可达90%以上,提取物中酚类含量约为34%.相比于溶剂浸提法,超声波和微波辅助提取方法可显著缩短檄榄酚类的提取时间,提高提取效率。采用大孔树脂吸附法对橄榄酚类提取物进行了纯化研究,结果表明,!大孔吸附树脂对橄榄酚类化合物具有较好的吸附和解吸性能,较适合于橄榄酚类成分的纯化,树脂柱(ocm×30em)的纯化工艺条件为:酚液pH值为其自然pH(),酚液浓度10mg/ml,吸附流速2mVmin,吸附温度为室温,此时树脂对酚类化合物吸附量最大,当上样体积达2倍柱床体积时酚类开始泄漏,当达到9倍柱床体积时,树脂吸附达到饱和,对吸附饱和的树脂进行洗脱,、蛋向等杂质,%(V/V)乙醇溶液以1ml/min的洗脱流速冲洗树脂,酚类解吸率可达95%以上。纯化后的檄榄酚类产品纯度从原先粗提物的34%提高到86%,,高于专利报道的76%的产品纯度,%,回收率为74%。利用硅胶柱层析、、聚酰***柱层析、TSKgelToyopearlHW-40柱层析以及制备硅胶薄层层析等多种方法对橄榄酚类提取物中的酚类组成进行了分离纯化并采用HPLC法对各酚类化合物的相对含量进行测定。结果表明,从橄榄果实中提取分离出了16种酚类化合物单体,并通过UV、IR、HPLC-、lDNMR(‘H-NMR、1sC-hiMR、DEPT-135)和2DNMR(1H-1HCOSY、HMQC、HMBC)等波谱检测技术及结合化学方法对酚类化合物单体的结构进行了鉴定,橄榄果实酚类化合物组成分别为:%、3,3L二甲氧基-2,2’,4。%、六羟基联苯二甲酸(HHDP)的烷基化衍生物Ⅳ%%、%、%、-%、穗花衫双黄***1l%、六羟基联苯二甲酸(HHDP)%和Ⅻ%、%、%、%、3-(9-没食子酰基江南人学博1:%、%、%。-D-没食子酰基奎宁酸j-酯为一新的酚类化合物,其余化合物除没食子酸和金丝桃苷外均是首次在橄榄植物中分离得到。关键词:橄榄,酚类化合物,提取,分离纯化,结构鉴定英文摘要Separation,(Canariu