蛋白酪氨酸磷酸酶1B抑制剂的化学合成及其活性的分析.pdf

青岛科技大学研究生学位论文蛋白酪氨酸磷酸酶1B抑制剂的化学合成及活性研究摘要蛋白酪氨酸磷酸酶iB(PTPlB)作为蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPs)家族中的一员,是一类信号传导酶,() ()的脱磷酸化作用而实现,有实验证实,将PTPlB 基因敲除可使小鼠体重不增长,因此,PTPlB作为胰岛素的负调控因子在信号传导方面的作用,目前已成为公认的治疗II型糖尿病和肥胖症的作用靶点。从海藻中提取的卤代苯酚化合物,通常具备多样的生物活性,如细胞***活性,抗菌活性,抗氧化活性,抗肿瘤活性等。本课题组成员通过对该类化合物结构分析发现,小分子卤代苯酚类化合物通过杂环化合物(如2,***、海因,结构如下)结构修饰,能够对PTPlB的活性产生较为明显的抑制性。本文拟以此类化合物为先导物,合成一系列结构类似的溴代苯酚杂环化合物。 H H OVNVO OVNVO L≤ L‘ Thiazolidine一2,4一dione Imidazolidine-2,4一dione l、溴代苯酚化合物的合成。结合参考文献对反应条件进行了摸索,设计出较为合理的路线。产率达到70%以上,完成了对目标化合物的合成,并对合成的化合物经过1H-NMR、13C-NMR、DEPT谱进行了结构鉴定,并证实了所合成化合物结构的正确性。实验结果表明,该合成方法不仅产率较高,而且后处理较为简单,少数化合物通过硅胶柱的分离能够得到所需结构的目标化合物。 2、酶活力测定方法的建立与抑制活性的测定。'Se 曲线、最适pH、底物(pNPP)浓度对反应速率曲线的测定以及Lineweaver-Burk 双倒数曲线的绘制,得出如下结论:PTPlB的反应速率(以t-OD作图得到的曲线斜率)只在最初一段时间内保持恒定,随后反应速度逐渐下降,最后趋于平衡;选反应前3 OD/min;PTPlB的最适 。以%Inhibition值作为化合物抑制能力的评判标准,即固定PTPlB. 底物的反应体系,改变化合物的浓度,将反应前3 min的OD405值与未加化合物的体系对比。对合成的12个化合物进行了抑制活性的测定,结果表明,有2 个抑制活性较好的化合物,分别为5.(5,***).2,4. 噻唑烷二***、5.(5,-***).2,***, 万方数据蛋白酪氨酸磷酸酶lB抑制剂的化学合成及活性研究其%、。 3、体外PTPIB酶抑制活性测定及构效关系研究。米氏常数的测定,随着底物pNPP浓度的增加反应速率逐渐增加,在pNPP达16mM以上时,反应速率基本趋于最大值, mM,并测定了阳性抑制剂钒酸钠和化合物12的抑制类型,结果显示,两个化合物对PTPlB均为竞争性抑制,其Ki 值分别为33“M、60州。关键词: 蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTPlB)酶促反应动力学抑制剂构效关系万方数据青岛科技大学研究生学位论文 C脏ⅦCAL SYNTHESIS 0F PROTEIN TYROSINE PHOSPHATASE 1BD佃BITORS AND STUDIES OF ACTIVITIES ABSTRACT Protein tyrosine phosphatase B(PTP B)as amember ofprotein tyrosine phosphatases(PVPs),is akind ofsignaling enzymy regulates insulinsignaling by insulinreceptor substrate-1 ORS—1)and insulinreceptorsubstrate一2(IRS一2)of the have confirmed thatthePTP Bknockout mice can not increase body weight,therefore,the role ofPTP B insignal transduction regarded as anegative regulator ofinsulin,has e recognized asthetreatment oftype IIdiabetesandobesity targets. Halogenated pounds extracted from seaweed have diverse biological activities,such as cytotoxic