血液学一般检查(一).pptx

河科大二附院检验科
血液学一般检查
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概述红细胞计数血红蛋白测定红细胞形态检查血细胞比容测定红细胞平均指数红细胞体积分布宽度
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血液是由血细胞(二)血红蛋白的合成
(三)血红蛋白的代谢
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一)血红蛋白分子结构及成分
血红蛋白是珠蛋白与血红素相结合的球形大分子化合物。每个Hb分子含有4条珠蛋白肽链，每条折叠的珠蛋白肽链包裹（结合）一个亚铁血红素，形成具有四级空间结构的四聚体，即完整的Hb分子。只有这种四聚体结构才具有结合O2和CO2 的生理功能。
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珠蛋白具有种属特异性。每个珠蛋白分子含有两条α链和两条非α链（ β 、γ、 δ）。***为两条α链和两条β 链，胎儿为两条α链和两条γ链。 （δ链在胎儿和***期合成均较低）
亚铁血红素由2价铁原子和原卟啉Ⅸ组成
在正常状态，机体有99%Hb的铁原子呈Fe2+状态，称为还原Hb，l%的Fe3+为高铁血红蛋白，只有亚铁状态的Hb才能与氧结合，此时称氧合血红蛋白。血红素与氧分子的结合有协同效应。解离曲线呈S形。
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(二)血红蛋白的合成
影响Hb合成的激素有2种；一是红细胞生成素（EPO），可促进δ-氨基-γ***戊酸(ALA)的生成与铁的利用．从而促进血红素和Hb的合成；二是雄激素，睾***在肝脏内由5-β还原酶转变为5-β氢睾***，它能促进δ-氨基-γ***戊酸合成酶的生成。
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(三)血红蛋白的代谢
血红蛋白分子降解为珠蛋白和血红素．血红 素中大部分铁由单核-吞噬细胞系统细胞加工处理后，再重新回到循环血液中，与运铁蛋白结合进入铁代谢库。珠蛋白由一系列蛋白酶和肽酶作用分解为氨基酸组分(内源性氨基酸)，与外源性氨基醒混在一起，进入氨基酸代谢，可再参与合成蛋白质和多肽或转变成其他含氮物质。
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检测原理
1．***化高铁血红蛋白(HiCN)测定法
2．其他测定法
有十二烷基硫酸钠血红蛋白（SDS-Hb）法、叠氮高铁血红蛋白(HiN3)法、碱羟血红蛋白法、 沙利(Sahli)酸化血红蛋白法、溴代十六烷基三甲***血红蛋白测定法（CTAB）等
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1．***化高铁血红蛋白(HiCN)测定法 血液中，除了硫化血红蛋白外各种血红蛋白均可被高铁***化钾氧化为高铁血红蛋白，再和CN-结合生成稳定的棕红色复合物***化高铁血红蛋白。***化高铁血红蛋白在540nm处有一吸收波峰，用分光光度计测定该处的吸光度，再换算成每升血液中的血红蛋白浓度，或制备标准曲线供查阅。
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将标本稀释251倍，Hb的摩尔消光系数为44000（mmol•cm），分子量为64458，540nm波长比色得吸光度值A。比色杯光径
为1cm。血红蛋白浓度计算公式：
Hb(g/L)=Aג540HiCNX64458/44000X251
=
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方法学评价
Hb测定方法大致分为4大类：
①根据Hb分子组成测定总Hb法(全血铁法)。
②根据血液物理特性测定Hb(比重法、折射仪法)。
③根据Hb与O2可逆性结合的物性测Hb(血气分析法)。
④根据Hb衍生物光谱特点 定量测定Hb（最常用）。
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方法
优点
缺点
HiCN
操作简便、快速(5min)，结果稳定可靠， 试剂容易保存，便于质控，为参考方法
①KCN有剧毒
②高白细胞和高球蛋白可致浑浊。
③HbCO转化慢
SDS-Hb
十二烷基硫酸钠血红蛋白
不用剧毒试剂、无公害，操作简便，呈色稳定，准确度和精度高
①SDS-Hb消光系数未确定
②SDS质量差异性大。
③SDS溶血活力大，不适于同时进行自动化分析
AHD575
同HiCN法，不用剧毒试剂
不便于自动检测、***化血红素纯度达不到标准
HiN3
准确度和精密度高，试剂毒性低
HbCO转化慢
CTAB
溶血活力强，但不破坏白细胞，适合自动化分析
精密度和准确性低
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质量控制
1. 血标本 采血顺利、高脂血症、高球蛋白血症、高白细胞
2. 方法 HiCN测定为WHO和ICSH推荐的参考方法 十二烷基月桂酰硫酸钠法结果稳定可靠，准确，以用于部分C