科研课题结题汇报.ppt

科研课题结题汇报中国康复研究中心?课题名称:脊髓损伤继发骨质疏松致病因素的基础研究?课题负责人:纪树荣?课题组成员:叶超群、周红俊、陈慧、杨健、张蕴忱、钱书森等?立题时间: 2003 年9月?结题时间: 2006 年9月?项目编号: 2003-15 ?课题项目简介(目的) ?本研究拟采用脊髓损伤( spinal cord injury, SCI )动物为对象, 观察损伤平面以下骨组织形态学、生物力学、骨密度以及相应的骨代谢生化指标的变化,并进行分析研究,以探索脊髓损伤后骨质疏松( osteoporosis, OP )的发病机制,了解脊髓损伤动物的骨量、骨结构变化及骨的力学性能之间的相互联系和影响,从而为临床防治脊髓损伤后骨质疏松,进而为预防病理性骨折提供理论依据。预期成果及考核指标(1)预期可初步观察到实验 SCI 大鼠 OP 的某些病理变化,如骨组织形态计量学变化(骨小梁面积百分比、骨小梁宽度);骨生物力学变化(骨弹性载荷、最大载荷及弹性能量吸收值)等。(2)观察到分子生物力学水平、骨代谢调节方面的变化。(3)提出某些抑制骨质疏松方法的可能性。(4)结果以论文形式发表(水平达国内先进)。主要研究内容及方法(1) 106 只大鼠分为:正常对照组、假手术组、脊髓损伤组、脊髓损伤振动组四类,另有体外实验(观察细胞学及分子生物学改变)一组。总共有 10 组动物:体外实验组 6只;正常 6周对照组、正常 12 周对照组、假手术对照 6周组、假手术对照 12 周组各 10 只; SCI6 周组、 SCI12 周组、 SCI 振动 6周组、 SCI 振动 12 周组、 SCI 自6周开始振动组各 12 只。(2)制作动物模型:于第 10 胸髓段脊髓全横断。(3)振动干预: ①体外实验:对基质细胞进行振动,频率 20HZ , 加速度 ,2 次/天, 10 分钟/次,共 7天; ②体内实验:对振动组别动物施行振动处理, 参数同①。(4)测试指标及方法: ①骨代谢指标:利用试剂盒行生化检测(血清碱性磷酸酶、血清骨钙素、血钙); ②骨量、骨结构:双能 X线骨密度仪测量,骨组织形态计量学测定; ③骨生物力学性能测定; ④骨髓基质细胞培养; ⑤骨髓基质细胞成骨能力观察; ⑥骨髓基质细胞 OPGmRNA 、 RNAKLmRNA 表达测定; ⑦统计学资料处理。研究结果(1)骨代谢指标: SCI6 周和 12 周时,大鼠血清钙升高( P < );血清碱性磷酸酶和骨钙素无明显变化( P > )。(2)骨量和骨结构: SCI6 周时,股骨近端( P < )、远端骨密度( P < )、胫骨上端骨小梁厚度(P < )、骨小梁面积百分比( P < )明显降低, 胫骨上端单位面积破骨细胞数增加( P < ); SCI12 周时,除上述改变外,股骨中段骨密度、胫骨上端骨体积百分比也明显降低( P < )。(3)生物力学性能: SCI6 周时,大鼠股骨中段最大载荷明显降低、第五腰椎最大载荷和刚度明显降低; 12 周时,下降更明显。(4)骨髓基质细胞 OPGmRNA 、 RANKLmRNA 表达: SCI 大鼠( 6周及 12 周)的骨髓基质细胞 RANKLmRNA 表达明显上调, RANKL/OPG 比值明显升高, OPGmRNA 表达无明显改变。(5)7天的低频振动可提高体外分离培养的骨髓基质细胞 OPGmRNA 表达,对 RANKLmRNA 表达和 RANKL/OPG 比值无影响。(6)6周低频振动使 SCI 大鼠血钙降低,股骨近端骨密度升高; 12 周振动使第 5腰椎最大载荷增加,其他指标无明显改变; SCI 伤后 6周开始振动组指标无明显改变。