木材学实验指导书.docx

仪器分析实验指导书
适用专业： 化学工程与工艺专业
学 时： 10
福建农林大学材料工程学院
化学工程与工艺实验室
2011 年 8 月 30 日
实验一饮料中咖啡因的分析（6学时）
、目的要求:
；
柱温： 40℃； ST = 9 min, PT = 2 min ;
检测波长：以紫外测试结果为准（约为 273 nm） ；
进样：仪器基线稳定后，进咖啡因标准样，浓度由低到高；
进样量为5dL的待测饮料试液。
. 标准曲线的绘制
按标准试液浓度增加的顺序，在咖啡因的最大吸收波长处依次测定每个标准样的峰面积，
作峰面积－咖啡因浓度的标准曲线。
. 样品测定
从试样中吸取可乐、咖啡或茶叶水待分析液进样，于相同色谱条件下，按照 HP1100系列
高效液相色谱仪基本操作规程分析试液。 测定试样白峰面积(平行测定两次)，然后根据标准曲线 得出样品的峰面积相当于咖啡因的浓度 c (科g/mL)
五、实验结果与分析(数据如何处理)：
.记录吸收光谱的测定条件；观察咖啡因标样的吸收谱图，确定峰值波长 加ax和对应的吸光度
A max, 计算峰值波长处的摩尔吸光系数 OTaxo
表1咖啡因标准品的紫外吸收光谱测定记录表
测定条件
标样浓度(mg/mL)
取大吸收波长后ax (nm)
吸光度Amax
摩尔吸光系数；max ( L/mol cm)
.测定每一个标准样的保留时间。图上进样信号与色谱峰极大值之间的距离。
.根据标准试样色谱图中的保留数据，找到并标出试样色谱图中对应咖啡因的色谱峰。
.记录每一张色谱图上的峰面积，并对每一个样品求出平均值。
.用标准试样的数据作峰面积 A对质量浓度《mg/mL)的工作曲线。
.从工作曲线上求得试样中咖啡因的质量浓度 (mg/mL)。
表2咖啡因标准品和饮料试液的 HPLC测定记录表
序号
标样浓度
p ( g g，mL
1)
保留时间
tR(min)
进样次数
峰面积平均值
AS(mm2)
1
2
峰面积AS(mm2)
峰面积AS(mm2)
1
0
2
20
3
50
4
100
5
150
饮料
/
饮料中咖啡因的质量浓度 (mg / mL)
六、注意事项：
.不同品牌的可乐，茶叶，咖啡中咖啡因含量不大相同，称取的样品量可酌量增减。
.若样品和标准溶液需保存，应置于冰箱中。
.为获得良好结果，标准和样品的进样量要严格保持一致。
七、思考题：
.用标准曲线法定量的优缺点是什么？
.根据结构式咖啡因能用离子交换色谱法分析吗？为什么？
实验二 气相色谱法测定酒中C2H5OH含量（4学时）
、目的要求:
.学****气相色谱法测定含水样品中的 C2H50H含量;
.学****和熟悉氢火焰检测器的调试及使用方法；
.学****和掌握色谱内标定量方法。
二、实验原理:
内标法是一种准确而应用广泛的定量分析方法，操作条件和进样量不必严格控制，限制条件较 少。当样品中的所有组分不能全部流出色谱柱，某些组分在检测器上无信号或只需测定样品中的某 几个组分时，可采用内标法。
内标法具体做法是：准确称取样品，加入一定量某种纯物质作为内标物，然后进行色谱分析。 根据内标物的质量 ms与样品的质量 m及相应的峰面积 A求出待测组分的含量。
待测组分质量 mi与内标物质量 ms之比等于相应的峰面积之比。
mi
Aifi
ms Asfs
mi
Aifi ms Asfs
质量分数
Wi
mi Aifimis
m A sf sm
(2-1)
（或质量浓度p =
mi V
Aifimq , ,
, V为待测样品体积)
AsfsV
式中：fi、fs一为i组分和内标物的相对质量校正因子；
A人A s一为i组分和内标物的峰面积。
在实际工作中，一般以内标物作为基准，即 fs= 。选用内标物时需满足下列条件： （1）内标
物必须是待测试样中不存在的物质； （2）内标物应与试样中待测组分的色谱峰分开，并尽量靠近；
（3）内标物的量应接近待测物的含量； （4）内标物与样品互溶。
本实验样品中 C2H50H的含量可用内标法定量，以无水 n-C3H70H为内标物符合以上条件。
三、实验仪器与试剂：
.仪器
GC-2000 n型气相色谱仪 氢火焰检测器（FID） 毛细管色谱柱
微量注射器（5^L） 容量并5 （ 50 mL） 吸量管（2 mL, 5 mL ）
.试剂
无水乙醇 C2H50H