药品微生物限度检验方法标准操作规程.docx

IBMT standardization office【IBMT5AB-IBMT08-IBMT2C-ZZT18】
药品微生物限度检验方法标准操作规程修订版
标准操作规程
标 题：药品微生物限度检验方法标准品：称取供试品10g，%无菌***化钠溶液100ml中，用匀浆仪或其他适宜的方法混匀后作为供试液。在制备过程中，必要时可加适量聚山梨酯80，并适当加温，但不应超过45℃。
（1）非水溶性供试品：取供试品5g（5ml）加入含溶化的无菌司盘80　5g、单硬脂酸甘油酯3g、聚山梨酯80 10g混合物的烧杯中，用无菌玻棒搅拌成团后，慢慢加入45
℃%无菌***化钠溶液约80ml，边加边搅拌，使供试品充分乳化，作为供试液（1︰20）。
（2）肠溶胶囊（片）供试品：称取供试品10g，置含无菌磷酸盐缓冲液（）100ml的锥形瓶内，于45℃水浴中，保温、振摇，使溶解，作为供试液。
（3）含抑菌成分的供试品照《中国药典》2000年版附录“微生物限度检测法”制备供试液。
. 对照用菌液
. 控制菌检查均应作相应已知菌的对照试验，大肠杆菌的对照菌株为[CMCC(B)44 102]，其余对照菌株见《中国药典》2000年版附录。
取相应菌株的营养基斜面新鲜培养物1白金耳，接种至营养肉汤培养基内，培养18－20小时后，稀释至1︰106。对照菌的加入量为50－100个。
. 菌种短期保存法：凡使用菌种，一般接种在普通琼脂斜面上，经37℃培养18－20小时，取出在5℃的冰箱内保存备用即可，每月接种传代一次，数周内不致死亡。
. 检查法
. 检查前的准备：
A. 用具的洗涤与灭菌。
试管：使用过的试管经消毒后，将培养基倒出，用清洁液洗刷，用纯化水冲洗4－5次，倒立，晾干备用。灭菌前，用棉塞塞上管口，牛皮纸包紧，扎紧。
标准操作规程
标 题
药品微生物限度检验方法标准操作规程
颁发部门
质量管理部
编号
SOP－QC－028－01
页次：4/12
B. 吸管：使用过的吸管用清洁液浸泡数分钟后，用纯化水冲洗4—5次，晾干，备用。灭菌前，，用牛皮纸裹紧。
C. 研钵：使用过的研钵用清洁液洗刷后，用纯化水冲洗数次，晾干备用。灭菌前，用牛皮纸将钵体和锤包裹。
D. 培养皿：使用过的培养皿经消毒后，将培养基倒出，用清洁液洗涮，用水冲洗4－5次，倒立、晾干各用。灭菌前，根据消毒器内经大小用牛皮纸包数个培养皿，扎紧。
将上述包好的用具，放在121℃的高压蒸汽消毒器中，灭菌30min后，放入微生物限度检查室定点位置，备用。
将所有已灭菌的培养皿、三角瓶、吸管（ 1ml、 l0ml）、稀释剂及供试品等移至无菌室内。每次试验所用物品必须事先计划，准备足够用量，避免操作中人出操作间。将全开启无菌室紫外线杀菌灯和空气过滤装置并使其工作30min。操作人员用肥皂洗手，关闭紫外线杀菌灯，进入缓冲间，换工作鞋，%新洁尔灭或用75%乙醇棉球擦手，并擦拭供试品瓶、盒、袋等的开口周围，待干后将供试品瓶、盒、袋启封，启封后先检查瓶盖内侧及瓶口周围有无生霉、长螨的迹象，对肉眼可见疑似者，若经证实为生霉、长螨即可判定为不合格，无须继续检验。
. 细菌、霉菌、酵母菌计数。
. 检查程序（如下列图1）。
. 操作步骤
a.?供试液制备：经阴性对照联样后，按各类制剂备供试液的方法（见10供试液的制备）制备。
b. 稀释及取样
稀释：取1ml吸管1支，吸取混匀的1︰10供试液（或原液，1：20供试液）1ml，在离稀释剂液面上约1cm处，测管壁注入装有9ml的稀释剂的试管中，混匀成1︰100（或1︰10，1︰200）的稀释液。
吸样：用上述吸管分别取1︰10供试液（或原液，1︰20供试液）1ml，注入2~3个平皿中，以另一支1ml吸管，按上述操作下一级的稀释与吸取。
c. 注皿与干燥
标准操作规程
标 题
药品微生物限度检验方法标准操作规程
颁发部门
质量管理部
编号
SOP－QC－028－01
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报告
菌落计数
供试品
1︰10
供试液
1︰100
供试液
1︰1000
供试液
1︰1000
供试液
1︰100
供试液
1︰10
供试液
注皿
培养
（图1）
事先将培养融化，置45℃水浴中，备用，当供试液及各稀释液均注入平皿后，以上述培养