优选中药淫羊藿总黄酮含量测定方法.doc

1 优选中药***羊藿总黄***含量测定方法作者:陈永刚刘晓涵林励区计明肖凤霞罗穗红【摘要】[ 目的] 比较不同测定方法对中药***羊藿总黄***含量测定的影响。[ 方法] 分别采用《中国药典》(200 5 版) 方法( 药典法) 和《保健食品检验与评价技术规范》(200 3 版)中2 种方法( 检验一法和检验二法) 测定。[ 结果]3 批***羊藿药材中, 药典法所测总黄***含量均值为 , 检验一法所测总黄***含量均值为 ,检验二法测得的总黄***含量均值为 。[ 结论] 采用保健食品检验二法测定***羊藿总黄***含量更为简便、合理, 可考虑作为***羊藿中黄***类物质含量测定的首选方法。【关键词】***羊藿/ 化学总黄***/ 分析分光光度法紫外线***羊藿为小檗科植物***羊藿(Epimedium brevicornum Maxim.) 、箭叶***羊藿〔 Epimedium sagittatum( )Maxim. 〕、柔毛***羊藿(Epimedium pubescens Maxim.) 、 2 巫山***羊藿(Epimedium wushanense ) 、或朝鲜***羊藿(Epimedium koreanum Nakai) 的干燥地上部分。《本草纲目》称其有”益精气,坚筋骨,补腰膝,强心力”之功效。各种***羊藿均以***羊藿苷、***羊藿次苷及***羊藿新苷等黄***类成分为主[1] 。现代药理实验研究表明[2], ***羊藿总黄***能增加心脑血管血流量, 促进造血功能、免疫功能及骨代谢, 具有抗衰老、抗肿瘤等功效。关于总黄***的测定方法报道较多[3-4] ,目前收载入相关国家标准的有 3 种方法: 国家食品药品监督管理局颁布的”保健食品检验与评价技术规范实施手册”收载的 2 种方法[5]( 简称”检验一法”和”检验二法”);2005 版《中国药典》收录的方法( 简称”药典法”)[6] 。但关于此 3 法的准确性、合理性比较研究尚未见报道。本试验以***羊藿为研究对象, 以其总黄***含量为评价指标, 比较了上述 3 种方法对其含量测定的影响,为***羊藿中总黄***最佳测定方法的优选提供依据。现报道如下。 1 材料 仪器 8453E 型紫外可见分光光度计( 美国 Agilent);BP211D 电子分析天平(德国 Sartorius);KQ 拟 500型 3 超声波清洗器( 昆山市超声仪器有限公司)。 药材与试剂***羊藿药材( 样品 1 批号为 080602 ,样品2 批号为 080626 ,样品 3 批号为 080731) 购自广州致信药业有限公司,经广州中医药大学中药学院林励研究员鉴定, 其原植物为小檗碱科植物***羊藿(Epimedium brevicornum Maxim.) 的干燥地上部分; ***羊藿苷对照品( 批号: 110737 拟 200414) 、芦丁对照品( 批号: 100080 拟 200306) 均购自中国药品生物制品检定所; 聚酰***粉( 柱层析用, 60拟 80目) 由浙江台州市路桥四甲生化塑料厂生产; 水为双蒸水, 甲醇、乙醇、苯、***铝等试剂均为分析纯。 2 方法与结果 药典法测定***羊藿中总黄***含量 ***羊藿苷对照品溶液的制备取***羊藿苷对照品,精密称定,加甲醇制成 的溶液作为储备液, 备用。 样品溶液的制备取本品叶片粉末(过3 号筛)约 ,精密称取,按文献[6] 方法制备供试品溶液,备用。 4 标准曲线的绘制取” ”项下储备液,置 10m L 量瓶中,加甲醇分别配制成浓度为 、 、 、 、 的溶液, 以甲醇为空白, 采用紫外可见分光光度法,在 270nm 波长处测定吸光度, 以对照品溶液浓度为横坐标, 以吸光值为纵坐标, 绘制标准曲线, 得直线回归方程为 Y=-(r= ,线性范围 ~ ) 。 精密度试验取***羊藿对照品溶液() ,连续测定 5 次,结果其吸收度的均值为 , sR为 % ,表明精密度良好。 重复性试验精密称取同一供试品 ,平行 5 份, 按上述方法测定其含量, 结果其含量的均值为 , sR为 % ,表明该方法的重复性较好。 稳定性试验取同一供试品溶液,分别在 0、 15、 30、 45、 60min 测定其吸收度, 结果其吸光度均值为 , sR为 % ,说明供试品溶液在 60min 内是稳定的。 加样回收率试验精密称