小鼠睾丸取法 不同证候荷瘤小鼠睾丸差异表达基因的特征.docx

小鼠睾丸取法 不同证候荷瘤小鼠睾丸差异表达基因的特征
　　摘要 目的：视察荷瘤小鼠肿瘤发生后不同阶段4个常见证候睾丸独特上、下调的基因。方法：采纳荷瘤小鼠及其标准化四诊与辨证方法，及GeneChip Mous动物表达。SWAM2是一个从小鼠克隆的具有抗菌活性的WAP基序蛋白，组织特异性视察发觉在舌表达。人类hu－WAP2基因被认为是SWAM2。 　　　早期邪毒壅盛证下调的基因：见表2。Spcs1、Seel113、Dtx3、Rasa3、这些基因在人类、小鼠等种属均有表达，检索得到的基因功能探讨的文献较少，功能不详。F5有利于血纤维蛋白形成，人类该基因编码一个重要的凝血瀑布反应的辅因子。 　　　早期气虚证上调的基因：见表3。Gpx5、Lcn5在其它证候几乎不表达，唯独气虚证独特高表达。在小鼠，GPX5是一个分泌性蛋白质，由附睾头大量合成。早期由头状花序的起始段分泌，GPX5和精子膜联合作用可以爱护其免受溶蛋白性裂解，其结合到精子的顶体粒，爱护精子免受顶体反应影响。人类该基因属于谷胱甘肽过氧化物酶家族，特异性地在附睾表达，并受雄激素的调整。Len5属于小鼠附睾特异性表达的lipocalin家族基因簇，为鼠科附睾的维甲酸结合蛋白质(mE-RABP)，由小鼠中部或远侧附睾头的主细胞合成及分泌，也受雄激素的调整。Wbp5、Apls2基因功能不清。 　　　早期气虚证下调的基因：见表4。基因少，仅一个。 　　 中期阳气虚证下调的基因：见表5。中期阳气虚证没有人选上调的基因。Spag5在小鼠位于有丝分裂期的有丝分裂纺缍体，在减数分裂及圆形精子细胞表达，可能在减数分裂及精子细胞的形态形成中发挥功能性作用。又名Mastrin，其总氨基酸序列有66％与人类astrin一样，人类astrin是一个微管相关蛋白，在睾丸组织高表达，基因缄默导致生长抑制及凋亡细胞死亡。 　　　中晚期气阴阳虚证上调的基因：见表6。Saa3和S100a8这两个基因在其它证候表达水平不高，在中晚期表达上调明显。Saa3以往发觉由脂肪细胞分泌，与炎症反应有关，是一个主要的急性相蛋白。S100a8与免疫反应有关，人类该蛋白可能具有抑制酪蛋白激酶的功能。 　　 中晚期气阴阳虚证下调的基因：见表7。其中，Cuzd1又名U0O-4，人类UO-44在卵巢癌过表达。在卵巢细胞系NIH－OVCAR3，siRNAs介导HuUO-44缄默能抑制细胞生长及增殖，并增加癌细胞对顺铂引起的细胞毒性的敏感性。Mue10、Abpg、Pip、Car6在早期邪毒壅盛证上调。 　　 　　3　探讨 　　 　　在肿瘤发生后的不同阶段的不同证候存在着睾丸基因表达的变更，邪毒壅盛证睾丸差异表达的基因13个，早期气虚证差异表达的睾丸基因5个，中期阳气虚证差异表达的基因5个，且无上调的基因，晚期气阴阳虚证差异表达的基因5个，合计28个。提示荷瘤小鼠在早期阶段，邪毒壅盛的实证与睾丸基因表达的紊乱关系较为亲密；中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证睾丸基因以下调为主，提示中、晚期荷瘤小鼠的虚实夹杂证睾丸功能下降。 　　一些基因在不同证候中出现上调和下调。主要Muc10、Abpg、Pip、Car6等4个基因，在早期邪毒壅盛证上调，中晚期气阴阳虚证下调；Gpx5在气虚证上调，在