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实验一显微镜的构造及使用方法
一、目的要求
了解显微镜的构造、性能及成像原理。
掌握显微镜的正确适用及维护方法。
二、实验器材
显微镜、纱布、绸布
酵母菌示教标本
三、普通光学显微镜简介
微生物的最显著的特点就是个体微小,必须借助显微镜才能观察到它们的个体形态和细胞结构。熟悉显微镜并掌握其操作技术是研究微生物不可缺少的手段。
显微镜可分为电子显微镜和光学显微镜两大类。光学显微镜包括:明视野显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、偏光显微镜、荧光显微镜、立体显微镜等。其中明视野显微镜为最常用普通光学显微镜,其它显微镜都是在此基础上发展而来的,基本结构相同,只是在某些部分作了一些改变。明视野显微镜简称显微镜。
(一)显微镜的构造
普通光学显微镜的构造可以分为机械和光学系统两大部分。
图1-1 显微镜构造


机械系统:
镜座Base:在显微镜的底部,呈马蹄形、长方形、三角形等。
镜臂Arm:连接镜座和镜筒之间的部分,呈圆弧形,作为移动显微镜时的握持部分。
镜筒Tube:位于镜臂上端的空心圆筒,是光线的通道。镜筒的上端可插入接目镜,下面可与转换器相连接。镜筒的长度一般为160mm。显微镜分为直筒式和斜筒式;有单筒式的,也有双筒式的。
旋转器Nosepiece:位于镜筒下端,是一个可以旋转的圆盘。有3~4个孔,用于安装不同放大倍数的接物镜。
载物台Stage:是支持被检标本的平台,呈方形或圆形。中央有孔可透过光线,台上有用来固定标本的夹子和标本移动器。
调焦旋钮:包括粗调焦钮Coarse adjustment knob和细调焦钮Fine adjustment knob,是调节载物台或镜筒上下移动的装置。
2. 光学系统
接物镜Objective lens,常称为镜头,简称物镜,是显微镜中最重要的部分,由许多块透镜组成。其作用是将标本上的待检物进行放大,形成一个倒立的实像,一般显微镜有3~4和物镜,根据使用方法的差异可分为干燥系和油浸系两组。干燥系物镜包括低倍物镜(4~10x)和高倍物镜(40~45x),使用时物镜与标本之间的介质是空气;油浸系物镜(90~100x)在使用时,物镜与标本之间加有一种折射率与玻璃折射率几乎相等的油类物质(香柏油)作为介质。
接目镜Eyepiece lens:通常称为目镜,一般由2~3块透镜组成。其作用将由物镜所形成的实像进一步放大,并形成虚像而印入眼帘。一般显微镜的标准目镜是10x。
聚光镜Condenser:位于载物台的下方,由两个或几个透镜组成,其作用是将由光源来的光线聚成一个锥形光拄。聚光镜可以通过位于载物台下方的聚光镜调节旋钮进行上下调节,以求得最适光度。聚光器还俯有虹彩光圈(Iris diaphragm),此调节锥形光拄的角度和大小,以控制进入物镜的光的量。
反光镜:反光镜是一个双面镜,一面是平面,另一面是凹面,起着把外来光线变成平行光线进入聚光镜的作用。使用内光源的显微镜就无需反光镜。
光源:日光和灯光均可,以日光较好,其光色和光强都比较容易控制,有的显微镜采用装在底座内的内光源。
(二)显微镜的成像原