实验植物组织培养课件.ppt

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NaCl
冰水
植物组织培养
实验六
(1)深刻理解植物组织培养的基本概念和理论依据。
(2)训练利用实验室的条件来合理设计和完成实验的基本技能。
实验目的
植物组织培养就是将植物离体的生活部分(如器官、组织、细胞甚至原生质体等)通过无菌操作接种在适宜的培养基上,在人工控制的条件(如温度、光照、湿度等)下进行培养的技术。
理论依据:植物细胞的全能性。
植物体的每一个细胞都携带着一套完整的基因组,并具有发育成完整植株的潜在能力。
实验原理
外植体
接种
完整植株
脱分化
再分化
外植体
愈伤组织
芽、根
实验设计的依据
依据一
分化
培养基中植物生长物质的种类和浓度在脱分化和再分化中起重要作用,尤其是生长素和细胞分裂素类的比例。
实验设计的依据
依据二
生长素类/细胞分裂素类
高诱导根的分化
中愈伤组织生长不分化
低诱导芽的分化
①MS培养基的大量元素;
②MS培养基的微量元素;
③MS培养基的铁盐;
④有机附加成分;
⑤NAA、6-BA;
⑥蔗糖、冷凝脂;
⑦/LHCl。
条件一:实验药品
实验条件
A无机营养(包括植物必需的大量和微量元素,均以盐的形式加入)
B碳源(一般为蔗糖,浓度30g/L左右),作用是提供营养和维持渗透平衡。
C有机附加物(主要有氨基酸、水解酪蛋白;VB1、VB6、烟酸(VB3)和肌醇,等)
D植物生长物质(生长素类和细胞分裂素类等)
培养基的成分
条件二:实验仪器及设备
①烧杯、移液器、量筒、精密电子天平、三角瓶、pH试纸、封口膜等;
②高压灭菌锅;
③无菌操作间、超净工作台;
④能够控制光照和温度条件的培养室。
实验条件
要求
以菊花无菌苗为材料进行以下培养基的设计。
(1)诱导菊花无菌苗叶片形成愈伤组织
(2)诱导菊花无菌苗茎段形成芽
实验设计