南京大学分子生物学第16讲课件.ppt

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(一)操作子上与阻遏蛋白结合的位点
1,lacI基因的表达特点
2,lac操作子(lacO)与阻遏蛋白的结合
(1)阻遏蛋白与lacO结合的实验证据
(2)lacO与阻遏蛋白结合的位点及其结构
A,DNA内切核酸酶消化实验证明:受阻遏蛋白保护区域位于-5~+21(26bp)
B,阻遏蛋白保护位点
C,lacO的结构及其与阻遏蛋白的结合性质
(3)阻遏蛋白有效地使RNA聚合酶与lac启动子上形成一个很强的关闭式的转录起始复合物,阻止转录的起始
(4)阻遏蛋白的这种作用对操纵元的诱导也有促进意
4,上述模式不一定适用于其他系
(二)阻遏蛋白上与操作子结合的位点
1,阻遏蛋白单体的结构
(1)长头片段(longheadpiece)
(2)短头片段
(3)核心片段(core)
(4)铰链区
2,阻遏蛋白四聚体的结构
3,阻遏蛋白与操作子的结合
4,阻遏蛋白需要组成四聚体才能实现完全的阻遏作用
(1)lac系统存在多个操作子
(2)阻遏蛋白四聚体可以同时与两个操作子结合
(3)阻遏蛋白结合第二个操作子影响阻遏的水平
(四)影响阻遏蛋白与操作子相互作用的突变体
1,i-突变体
2,iS突变体
3,it突变体
4,i-d突变体
等位基因互补
5,Oc突变体
第四节分解代谢产物抑制涉及的启动子正调控
一、分解代谢产物抑制
1,某些启动子转录的起始需要辅助蛋白质
某些启动子缺乏保守的RNA聚合酶识别位点(-35序列/Sextama框)和结合位点(-10序列/Pribnow框),需要辅助蛋白质参与转录的起始
最常见的是大肠杆菌对碳源利用有关的一组操纵元,受一种代谢产物激活蛋白(cataboliteactivatorprotein,CAP)控制,在葡萄糖存在时保证细菌优先利用葡萄糖
二、CAP对启动子的正调控
1,cAMP在分解代谢产物抑制中的作用
葡萄糖引起cAMP水平下降是分解代谢产物抑制的原因
cAMP由腺苷酸环化酶(adenylatecyclase,cya)合成
cya基因突变体对葡萄糖变化没有反应