寄生虫样本的采集、制作及保存》课件.ppt

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深圳市疾病预防控制中心
二O一O年十一月
寄生虫样本的概念:
指用于标本制作、保种、冷藏的寄生虫不同生活史阶段的虫体材料、遗传材料及相关的生物材料,是寄生虫种质资源的实物资源。
一、寄生虫样本的采集:
掌握基本知识:了解人体寄生虫的形态、生活史
和生态以及地域分布等有关知识。
1、样本来源:
2、采集时注意事项:
1、样本来源:
肠道、腔道内的蠕虫卵、原虫滋养体或包囊:排泄物、分泌物
肠道内的蠕虫成虫:药物驱出
血液、骨髓内的寄生虫:抽取血液和骨髓穿刺
肝、肺、肌肉等组织内的寄生虫:穿刺、活检组织作切片
有些难以采到的寄生虫:动物接种及人工培养增殖
2、采集时注意事项:
①详细的样本记录:
②保持样本的完整:
③防止自身感染:
1、尽快适当处理:
①进行人工饲养。
②及时感染动物进行保种。
③需制作玻片标本时,%生理盐水将虫体粘附的污物
洗净,固定后制作玻片标本。
④如条件所限不能对样本及时处理,应立即将样本放入4℃冰
箱内,但时间不能过久,以免虫体腐烂。
2、固定方法:
固定处理使虫体在短时间内迅速死亡,保持虫体标本原有的姿态,并使虫体内的物质(如蛋白质、脂肪和糖类等)凝固,防止腐烂和自溶,保证虫体内部结构完整并易于着色。
无论是新鲜虫体还是病变组织,固定越及时越好。
常用的固定方法有物理固定与化学固定两种。
物理固定:以加热和干燥方法固定标本。
化学固定:用某些化学药品配成溶液来固定标本,这些溶
液叫做固定液。固定时将标本浸于固定液内。
3、常见的固定液:
常用于配制固定液的试剂有甲醛、乙醇、升***、苦味酸、冰醋酸等。
固定液分为单纯固定液与复合固定液两种。
单纯固定液配制简单,使用方便,但均不能兼备各种试剂的优点,因此较少应用。
复合固定液由两种以上化学药品配制而成,可利用各种药品的优点以互补不足,例如醋酸会使细胞膨胀,而乙醇与苦味酸反使细胞收缩,两者混合使用,可使收缩和膨胀作用抵消。
单纯固定液:
甲醛:具有较强的杀菌效果,能保存标本免于腐烂。由于其渗透力较强,有硬化标本的性能,故准备切片的活检组织多用此固定液保存。
乙醇:为无色液体,具有固定、保存和硬化标本的性能,渗透力强,其主要缺点在于吸收水分,能使标本收缩。由于乙醇可使虫体或组织收缩,表面硬化,因而较难渗入到组织深部,所以不宜固定大块组织。乙醇除了固定和保存虫体以外,还在制片过程中用于脱水。
复合固定液:
鲍恩氏(Bouin)固定液:含苦味酸饱和水溶液75份,甲醛25份,冰醋酸5份。固定时间3~12h,或过夜。临用时配制,不宜久藏。该固定液适用于一般小型蠕虫的固定。
劳氏(Looss)固定液:含升***饱和水溶液100ml,醋酸2ml。适用于固定小型吸虫,固定4~24h。
肖氏(Schaudinn)固定液:含升***饱和水溶液2份,95%乙醇1份,每100ml混合液中加入冰醋酸5~10ml。适用于固定肠原虫涂片,固定10~60min。
布莱氏(Bless)固定液:含70%乙醇90ml、40%甲醛7ml、冰醋酸3ml。此固定液渗透力强,为昆虫幼虫的良好固定剂,亦可固定小型吸虫和绦虫。