流式细胞的原理及临床应用课件.ppt

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什么是流式细胞仪?
检测流动中细胞(颗粒)的仪器
目标物可以是细胞、~50um范围内
抗体染色一般方法
外周血白细胞分析:100ul全血
血小板分析:1~5ul全血(根据样本血小板数量)
红细胞分析:1ul全血(根据样本中红细胞数稀释后使用)
骨髓:100ul
其他样本,计数后决定使用体积
目标细胞数量及检测终浓度:1×106/ml
孵育、溶血、固定
抗体孵育:室温下避光15分钟(某些情况下如:细胞内因子检测需冰育)
溶血:如样本含中有红细胞需溶血
样本溶血后离心上机检测(固定后可放置较长时间)
流式细胞仪分析报告及图谱
SS(侧向散射光)--反应细胞内物质的多少
FS(前向散射光)--反应细胞大小
设门:选择要分析的细胞群体
设定阴性、阳性范围
目前流式细胞仪临床检测项目
流式细胞仪的临床应用
HIV免疫分型,CD4绝对计数
白血病和淋巴瘤的免疫分型
肿瘤的细胞周期和倍体分析
网织红细胞计数
细胞移植的交叉配型和免疫状态监测
干细胞计数
残量白血病细胞检查
HLA-B27检查
血小板功能及相关疾病
1、HLA-B27的检测
强直性脊柱炎(ankylosingspondylistis)意为弯曲的脊柱。它是和种慢性、进行性和炎性疾病,主要累及骶骼关节、脊柱、脊柱骨软组织及四肢关节,表现为椎间盘维环和纤维环附近结缔组织的骨化,椎间动关节和四肢关节滑膜的炎症和增生,严重者可失去劳动能力。强直性脊柱炎是血清阴性脊柱关节病中具有代表性的疾病,临床上曾长期把AS误认为是类风湿性关节炎的一个亚型,60年代以来人们才认识到期无论从病因学、遗传学、流行病学和临床表现特点等诸多方面来看,AS都是一种不同于类风湿性关节炎的独立疾病。就目前的研究文献而言,HLA-B27与AS并非绝对相关,有些AS患者表现为HLA-B27阴性,而且并非所有HLA-B27阳性者均出现AS症状。
B27与强直性脊柱炎