血红蛋白的提取与分离优质课.ppt

该【血红蛋白的提取与分离优质课 】是由【pangzhan335】上传分享，文档一共【54】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【血红蛋白的提取与分离优质课 】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。课题(kètí)3血红蛋白的提取和别离
第一页,共五十四页。
思考1别离生物(shēngwù)大分子的根本思路是什么?
选用一定的物理(wùlǐ)或化学的方法别离具有不同物理(wùlǐ)或化学性质的生物大分子。
思考2蛋白质的别离和提取的原理(yuánlǐ)是什么?
根据蛋白质各种特性的差异,如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度和吸附的性质和对其他分子的亲和力等等,可以用来别离不同蛋白质。
第二页,共五十四页。
思考3高温灭菌和酒精灭菌分别利用(lìyòng)蛋白质
的何种作用,作用结果是什么被破坏?
变性(biànxìng)、变性(biànxìng)、空间结构
思考4人们用鸡的红细胞提取DNA,用人
的红细胞提取血红蛋白(xuèhóngdànbái)的原因是什么?
鸡的红细胞具有细胞核,含有DNA,便于进行DNA的提取,人的红细胞无细胞核,结构简单,血红蛋白含量丰富便于提取血红蛋白。
第三页,共五十四页。
一、根底知识:
㈠凝胶色谱法〔分配(fēnpèi)色谱法〕:
1、凝胶:
一些微小(wēixiǎo)多孔的球体〔内含许多贯穿的通道,由多糖类构成如葡聚糖、琼脂糖,具多孔的凝胶就叫分子筛〕
2、概念:根据被别离物质的蛋白质相对分子质量(zhìliàng)的大小,利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,来进行别离。
第四页,共五十四页。
3、原理(yuánlǐ):当不同的蛋白质通过凝胶时,相对〔〕的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程〔〕,移动速度〔〕,而〔〕的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在〔〕移动,路程〔〕,移动速度〔〕,相对分子质量不同的蛋白质因此得以别离。
相对(xiāngduì)分子质量较小
较长
较慢
相对分子质量(zhìliàng)较大
凝胶外部
较短
较快
大分子通过多孔凝胶颗粒的间隙,路程短,流动快
小分子穿过多孔凝胶颗粒的内部,路程长,流动慢
第五页,共五十四页。
洗脱:从色谱柱上端不断注入缓冲液,
促使蛋白质分子的差速流动。
混合物
上柱
洗
脱
大分子流动快
小分子流动慢
收集
大分子
收集
小分子
第六页,共五十四页。
第七页,共五十四页。
第八页,共五十四页。
1、概念:在一定的范围内,能对抗外来少量强酸、强碱或稍加稀释不引起(yǐnqǐ)溶液PH发生明显变化的作用叫做缓冲作用,具有缓冲作用的溶液叫做缓冲溶液。
㈡缓冲溶液(huǎnchōnɡrónɡyè):
2、作用:
能够抵抗〔〕的对溶液(róngyè)的〔〕的影响,维持PH根本不变。
外界的酸或碱
PH值
第九页,共五十四页。
3、缓冲溶液(huǎnchōnɡɡrónɡɡyè)的配制
通常由〔〕〕种缓冲冲剂溶解(róngjiě)于水中中配制而成。。调节缓冲剂剂的〔〕〕就可以制制得〔〕〕使用的缓缓冲液。
1-2
使用(shǐyòòng)比例
在不同PH范围内
思考:说出人人体血液中缓缓冲对。
NaH2PO4/Na2HPO4
H2CO3/NaHCO3
第十页,共五五十四页。