食品中乳酸菌的检测.doc

食品中乳酸菌的检测
1 范围
本标准规定了含乳酸菌食品中乳酸菌(lactic acid bacteria)的检验方法。
本标准适用于含活性乳酸菌的食品中乳酸菌的检验。
2 规范性引用文件
本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本标准。
3 术语和定义
乳酸菌 lactic acid bacteria
一类可发酵糖主要产生大量乳酸的细菌的通称。本标准中乳酸菌主要为乳杆菌属(Lactobacillus)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)和链球菌属(us)。
4 设备和材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:
恒温培养箱:36 ℃±1 ℃。
冰箱:2 ℃~5 ℃。
均质器及无菌均质袋、均质杯或灭菌乳钵。
天平: g。
无菌试管:18 mm×180 mm、15 mm×100 mm。
无菌吸管:1 mL( mL刻度)、10 mL( mL刻度)或微量移液器及吸头。
无菌锥形瓶:500 mL、250 mL。
5 培养基和试剂
MRS(Man Rogosa Sharpe)培养基及莫匹罗星锂盐(Li-Mupirocin)改良MRS培养基:。
MC培养基(Modified Chalmers 培养基):。
%蔗糖发酵管:。
%纤维二糖发酵管:。
%麦芽糖发酵管:。
%甘露醇发酵管:。
%水杨苷发酵管:。
%山梨醇发酵管:。
%乳糖发酵管:见附录
。
七叶苷发酵管:
革兰氏染色液:。
莫匹罗星锂盐(Li-Mupirocin):化学纯。
半胱氨酸盐酸盐(Cysteine Hydrochloride):纯度>99%。 6 检验程序
乳酸菌检验程序见图1。
7 操作步骤

样品的全部制备过程均应遵循无菌操作程序。
冷冻样品可先使其在2 ℃~5 ℃条件下解冻,时间不超过18 h,也可在温度不超过45 ℃的条件解冻,时间不超过15 min。
固体和半固体食品:以无菌操作称取25 g样品,置于装有225 mL生理盐水的无菌均质杯内,于8000 r/min~10000 r/min均质1 min~2 min,制成1:10样品匀液;或置于225 mL生理盐水的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1 min~2 min制成1:10的样品匀液。
液体样品:液体样品应先将其充分摇匀后以无菌吸管吸取样品25 mL放入装有225 mL生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分振摇,制成1:10的样品匀液。
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