当归芍药散对慢性心力衰竭大鼠机体水液代谢障碍的作用及其机制.pdf

该【当归芍药散对慢性心力衰竭大鼠机体水液代谢障碍的作用及其机制 】是由【学习一点】上传分享，文档一共【8】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【当归芍药散对慢性心力衰竭大鼠机体水液代谢障碍的作用及其机制 】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。万方数据当归芍药散对慢性心力衰竭大鼠机体水液代谢障碍的作用及其机制·实验研究·侯静钋煺,王运来烨钒曰猦慢性心力衰竭珻一种由多种因素导致心脏结构和功能发生损伤,引发动脉血液灌注不足,静脉血液淤积的全身性疾病在中医中属于“心水病”范畴,即心肌血液运行不利,瘀血停滞,导致病理性水液积聚,引发机体水代谢紊乱P闹骰穑鲋魉纳鱿嘟欢平阳秘;而在⑸⒎⒄构讨校纳龉δ苁调,二者在病理上交互损伤R虼耍纳菩纳龉能、调节机体水液代谢平衡对治疗哂兄卮意义。研究⑾郑毙脑啾醚9δ苁保账鹾舒张功能发生障碍,动脉内皮功能紊乱,导致重要器官的供血灌注不足,引发细胞内外液体稳态失衡。而镶嵌在细胞膜内的水通道蛋白谌颂迥谛矶嗥鞴僮橹赴诙加泄惴旱分布,并且承担着水分子跨越细胞膜的运输功能,维持体液动态平衡S醒芯縖な担募∪毖!⒐死等疾病造成心肌损伤引发岬贾翧达异常,导致水液代谢紊乱而发生组织器官水肿。目前,对颊咧瘟频某9娣椒ㄖ饕NG心、利尿、扩血管等H欢て谑褂谜庑┮┪锟能会导致严重的不良反应,包括利尿剂抵抗、低钠血症等6幸└捶狡窘瓒嗤揪丁⒍喟械阕饔糜诨体的特点,被认为是治疗奶娲瘟撇呗裕将只大鼠随机分为正常组,模型组,芪苈强心胶囊组,当归芍药散低、中、高剂量组,每组只,最终丶蔧当归芍药散;慢性心力衰竭;心肾功能;水液代谢障碍;水通道蛋白型挤掷嗪臸../甶基金项目:国家自然科学基金项目;安徽高校自然科学研究项目通信作者:许钒,男,博士,教授,博士研究生导师,://.,安徽合肥;幸└捶桨不帐≈氐闶笛槭遥不蘸戏R猐目的探讨当归芍药散对慢性心力衰竭琧笫蠡逅捍徽****挠跋旒白饔没制。方法正常组,模型组,芪苈强心胶囊组,当归芍药散低、中、高剂量组纳入实验的大鼠数分别为、、只。采用少量多次腹腔注射阿霉素复制笫竽P汀8周后,采用心脏彩色多普勒超声仪测定各组大鼠左心室射血分数,⒆笮氖叶讨崴醵搪,籋色观察心肾组织损伤情况;全自动生化分析仪检测心功能和肾功能指标∷峒っ,⒓∷峒っ竿工酶珻⑷樗嵬亚饷琇⒀G寮◆,、尿素氮,辈舛蛄俊⒏顾柿恳约霸嗥髦甘人捍恢副辏籈法测定大鼠血清端脑钠肽前体琋揭约耙谎趸:厦活性及一氧化氮琋、环磷酸鸟苷琧含量;免疫组织化学法检测大鼠心肌组织中水通道蛋白,蜕鲎橹蠥泶锼剑籛法检测大鼠心肌组织中诱导型一氧化氮合酶,蜕鲎橹衖泶锼健结果当归芍药散可改善笫笮纳龉δ埽跎傺G錘、、腹水等水液代谢指标以及脏器指数,改善心肌组织病理变化;降低心脏组织、、及肾组织中—、表达水平.=崧当归芍药散能够改善鸬乃捍徽****大鼠的心肾功能,其作用机制可能与抑制的过度分泌,下调、、蛋白的表达水平有关。作者简介:侯静,女,硕士研究生..;,瑃,.;籇籄.,万方数据占有重要地位。当归芍药散载于《金匮要略》,主要由当归、芍药、川芎、白术、茯苓、泽泻兑┎淖槌桑功能疏肝理血、健脾祛湿、和中利水,并符合虚、血瘀、水湿停滞的病机特点。既往临床研究口发现,运用当归芍药散加味治疗苊飨愿纳心力衰竭患者的临床症状,疗效确切。因此,本研究旨在进一步探究当归芍药散改善笫蠡逅液代谢紊乱的可能分子机制。材料动物芰銼级雄性大鼠只,体质量为鹤越漳暇┣嗔蕉锓敝吵砜芍ず牛篠苏。本实验经安徽中医药大学实验动物伦理委员会审查通过,伦理审批号:。实验动物在温度妗⑾喽允6ァサ幕肪诚陆兴茄养期间给予标准颗粒饲料,庹蘸诎到惶妗药物当归、芍药、川芎、白术、茯苓、泽泻购于安徽康和中药科技有限公司,生产批号分别是并通过安徽中医药大学金传山教授鉴定,均符合《中华人民共和国药典》臧项下标准。芪苈强心胶囊臖购于石家庄以岭医药有限公司。试剂盐酸多柔比星注射液:浙江瀚晖制药有限公司;四阅齐那疤猼琧试剂盒欧直鹞:上海江莱生物技术有限公司;一氧化氮合酶琋⒁谎趸琋试剂盒欧直鹞:南京建成生物工程研究所;、、、诱导型一氧化氮合酶,固欧直鹞猂:成都正能生物技术有限责任公司;甘油醛一涣姿脱氢酶籶抗体臿:美国仪器《锊噬ǘ嗥绽粘波成像系统:飞依诺科技股份有限公司;型全自动生化分析仪:日本日立公司;撼上裣低常好拦鶪荆籑全波长酶标仪:美国公司;偷缬疽牵罕本┝一生物科技有限公司。当归芍药散药液的制备《金匮要略》中当归芍药散原方含有当归咨↖芎、泽泻各资酢④蜍吒丛脚浔染烦屏恳┎暮螅用倍量%⑴ㄋ酢临用时配制成生药质量浓度为.、痬牡惫樯忠┥⒏摺⒅小⒌图亮恳┮骸模型复制、分组及给药将只大鼠分为正常组,模型组,芪苈强心胶囊组,当归芍药散低、中、高剂量组,每组只。除正常组外,其余只大鼠参考文献方法,采用腹腔注射阿霉素恐次,每次/,共埽刍亮看复制笫竽P停周后采用小动物彩色多普勒超声波成像系统进行超声检测,左心室射血分数,表明笫竽P椭票赋晒Γ%予以剔除,共剔除唬P透粗破诩溆淮笫笏劳觯8鎏逄质较差无法耐受阿霉素的药物毒性所致。饲养期间,正常组死亡唬虿幻鳌=P透粗瞥晒Φ拇笫随机分为模型组,当归芍药散低、中、高剂量组.·,连续给药堋8┲瘟破诩洌正常组有淮笫笏劳觯捎诠辔覆坏保笕肫苤死。给药芎螅髯榇笫笫课UW只,模型组唬诬虑啃慕耗易只,当归芍药散低、中、高剂量组分别为、弧超声心动图检查大鼠用ノ彀捅韧啄/腹腔注射麻醉后,胸部脱毛,四肢固定,采用小动物彩色超声波成像系统进行心脏超声检测,于乳头肌水平将腿⊙叽怪庇谑壹涓艉妥笮氖后壁获得统亩迹饬縇妥笮氖叶轴缩短率舛个心动周期,取平均值。蛄考案顾柿坎舛ǜ周后,将大鼠置于代谢笼收集大鼠蛞翰⒉舛蛄俊4对大鼠进行麻醉,沿腹中线切开,并将已称质量的滤纸塞入大鼠腹腔,待滤纸充分吸收腹水后取出,再次称质量,取其差值即为腹水质量。血清考吧副晁讲舛将大鼠麻醉后,腹主动脉取血,收集血液样本,分离血清。按照约梁兴得魇椴舛ù笫笱G錘含量,使用全自动生化分析仪测定大鼠血清肌酸激酶,⒓∷峒っ竿っ琋猵、环鸟苷酸方法/ゼ·。://.,、、..万方数据珻狹、乳酸脱氢酶琇⒀G寮◆,、尿素氮,水平。心肌组织及肾组织病理学检查分离各组大鼠的心肌组织及肾组织,用预冷淳缓螅%多聚甲醛中固定刑荻韧阉袂片,脱水染色,封片,观察心肌组织及肾组织病理形态的变化。脏器质量指数测定取各组大鼠心脏及肾脏,吸取多余残血及水分,放在预先称定质量的培养皿中,称质量,获得心脏、肾脏湿质量,计算脏器质量指数。脏器质量指数一脏器湿质量/体质量×ァ血清中、含量及钚圆舛ò凑试剂盒说明书要求,测定大鼠血清、含量、总一氧化氮合酶坝盏夹鸵谎趸:厦,钚浴免疫组织化学法检测心肌组织、及肾组织表达水平取出切片的组织块,按照例加入一抗,并放在冰箱中孵育一夜,遍后加二抗,放在。孪渲蟹跤<酉色剂,于苏木精中染色,封片,每张切片随机选取完整而不重叠的高倍镜视野,使用光学显微镜观察相关蛋白表达情况,并测定每个视野下阳性反应的平均吸光度琌值和阳性面积率。法检测心肌组织中、、及肾组织中、表达水平用裂解心肌组织和肾组织,并使用约梁屑觳庾橹总蛋白浓度。将蛋白按步骤进行电泳,转膜,封闭,按的比例加入相应的一抗孵育,并放在姹渲蟹跤一夜,遍后加二抗孵育毓庀杂埃褂砑治鱿喙氐鞍妆泶锴榭觥臣蒲Х椒采用软件进行统计分析。连续型变量采用“均数±标准差±”进行统计学描述。多组间均数比较采用单因素方差分析,组间均数多重比较采用煅讲钇胧或疭<煅方差不齐时2钜煊型臣蒲б庖濉当归芍药散对笫笮墓δ苤副甑挠跋与正常组比较,模型组大鼠、%;与模型组比较,当归芍药散各剂量组、芪苈强心胶囊组大鼠、均显著升高.<。当归芍药散对笫蟾顾柿亢量的影响与正常组比较,;与模型组比较,当归芍药散各给药组、,以当归芍药散高剂量组和芪苈强心胶囊组增加较为显著.<。当归芍药散对笫笱G錘猵、—、、降挠跋与正常组比较,模型组大鼠、—、、、芪苈强心胶囊组大鼠——、、—、、骄灾陆.<。当归芍药散对笫笮募⑸鲎橹±砀变的影响正常组大鼠心肌细胞结构完整,周边轮廓清晰可见。与正常组比较,模型组大鼠心肌细胞边缘模糊,问质炎症细胞浸润谏?匪。与模型组比较,当归芍药散各给药组、芪苈强心胶囊组大鼠心肌细胞损伤程度均降低。见图正常组大鼠肾小球的结构明显,未见肾小球萎缩,基底膜厚薄一致;与正常组比较,模型组大鼠肾组织结构改变,基底膜厚度增加谏?匪,伴炎症浸润;与模型组比较,当归芍药散给药组、芪苈强心胶囊组大鼠肾组织的病理损伤症状显著缓解。见图:、:的比照:结果蛄勘冉繱://.,表髯榇笫驦冉纒注:与正常组比较,”挥肽P妥楸冉希表髯榇笫蟾顾柿亢注:与正常组比较,”挥肽P妥楸冉希...—万方数据散各给药组、芪苈强心胶囊组大鼠心脏、肾脏质量指数均降低,,模型组大鼠心脏、、瓺、:与正常组比较,。挥肽P妥楸冉希注:;惫樯忠┥⒌;惫樯忠┏:人.『;惫樯忠┥⒌;惫樯忠┏:与正常组比较,“挥肽P妥楸冉希..、、≯、,卜一万方数据麟鬻黧蒸、’.·.蹋#’:ⅰ.ⅰ”ⅰⅰ’√、..‘当归芍药散对笫笱G錘钚约、含量的影响与正常组比较,模型组大鼠钚约癗肯灾。与模型组比较,当归芍药散各给药组、芪苈强心胶囊组大鼠活性及烤低,以当归芍药散高剂量组、芪苈强心胶囊组较为显著.<。当归芍药散对笫笮募⑸、较,当归芍药散各给药组、芪苈强心胶囊组大鼠上述及肾组织有微量表达;与正常组比较,蛋白表达水平均降低,以当归芍药散高剂量组、芪苈模型组大鼠心肌组织、。..P妥椋当归芍药散低剂量缉当归芍药散中剂量组当归芍约散高剂量组ⅰ■“.‘癷‘一当归芍药散对大鼠心肌、肾脏组织相关蛋白表疾病,当心脏泵血功能失效时,重要器官灌注减少,与正常组比较,模型组大鼠心肌组织从而导致液体稳态失衡,诱发组织器官水肿。因此,、、,┥各给药组、芪苈强心胶囊组大鼠心肌组织、表达水平均降低,以当归芍药散高剂量组、芪苈强心胶囊组较为显著%;当归芍药散各给药组、芪苈强心胶囊组大鼠肾组织、表达水平均显著降低%。见图⑼目前,痈卟幌碌姆⒉÷屎退劳雎适沟萌社会医疗机构都在致力寻求有效的治疗方法,以避免其成为沉重的社会负担种病因共同作用导致的心脏收缩和舒张功能障碍性堑湫偷乃捍徽****约膊。菏Ш馐瞧重要病理生理变化之一,可导致心功能进一步受损,改善机体水液代谢紊乱是治疗墓丶1臼验结果表明,笫蟮腖较灾跎伲时血清标志物水平显著上升,大鼠体质量和腹水量均明显增加,但蛄肯灾跎佟心肌组织病理结果也进一步表明,笫笮募∷伤明显,细胞出现大量凋亡。研究‘¨砻鳎秆管内皮的舒缩功能障碍在姆⑸⒄怪衅鹱重要作用,患者体内水平失常,对血管的舒张功能调节受限,并由此引起毛细血管内皮功能的失常,且与难现爻潭认嘁恢隆魑R恢内皮舒张因子,广泛分布于心脏、肾脏等器官中,由达的影响⒈、表致。且恢钟啥://.、含量比较畆注:与【W楸冉希盤.;与模型组比较,.常组芪苈强心胶囊组畂、图各组大鼠心肌组织、及肾组织表达水平比较庖咦橹旧ǎ五’:海.‘『..。:。⒁弧.。、’万方数据ぁぁぁ,●,瘢馹—■—■●●●—●●簟瘛●瘛瘛ぁ●瘛!瘛瘛—··左旋精氨酸在呋律桑せ钐迥诘幕妨啄苷,进一步生成;来发挥血管舒张作用口?。有研究发现,在山羊体外循环实验中,进一步生成的能够与调节体内水平衡的结合并激活,引发机体组织水肿。广泛分布于心脏和肾脏,作为细胞膜上的“孔道”,其主要控制水液在胞内胞外的运输,维持体内水液平衡转运心肌组织中的水液,而存在于肾集合管的,是调节肾组织水液稳态和尿液浓度的重要一环,介导水的重吸收””本实验结果显示,笫笞橹蠳的表达水平都出现异常升高,表明疦和参与笫笏捍徽****牟2由此提出治疗碌囊┪锇械悖诟璧惫樯药散时,可缓解由上述因素引起的水液代谢障碍,促进尿液排泄,减少腹水积液,减轻心肌损伤,减少水潴留。故当归芍药散有效改善机体水液潴留的机制可能与//途径有关。当归芍药散为活血利水的经典方剂,当归养血活血,芍药柔肝养血,川芎活血化瘀、行气镇痛,吨幸┖侠砼伍,共奏活血化瘀之功;茯苓健脾化湿、通利九窍,白术补气升阳,泽泻通利膀胱,共奏利水消肿之功。本研究结果表明,当归芍药散干预后明显升高,心肾功能指标、—、、平下降,蛄肯灾黾樱琲虯鞍椎表达受到抑制。://.∽橹疉吧鲎橹疉泶锏钠骄岛脱粜悦婊时冉±:与正常组比较,。挥肽P妥楸冉希注:W椋籋模型组;惫樯忠┥⒌;惫樯忠┥⒏呒亮孔椋籉芪苈强心胶囊组图各组大鼠心肌组织、、蛋白表达电泳图注:;惫樯忠┥⒌;惫樯忠┥⒏../薄海万方数据综上所述,当归芍药散能显著改善阿霉素诱导的笫笏捍徽****骺鼗逅T耍跚水肿,保护心肾功能,其作用机制可能与抑制/途径有关。该研究成果进一步证实了当归芍药散对治疗捍晃陕业淖饔眉盎疲为当归芍药散的应用提供了依据。U湔洌佑睿怯睿龋牧λソ叩墓挪∶骄林飞,王阶.“心肾相交”,:瓻踔妫芰眨跹螅龋孕牧λソ叩牧餍胁⊙≡又荆://.:与正常组比较,.;与模型组比较,表各组大鼠肾组织、蛋白相对表达水平比较参考文献:∫窖г又荆谢V幸揭┰又荆:—...医药杂志,,费羯剑挛埃镄〔ǎ噙崞绽月孕牧λソ叽笫笊脏水通道蛋白湍蛞核ǖ赖鞍表达的影响中华心血管病杂志,,—琍.,,琖:,谢姗珊,曙阿克·哈尔恒,┐笱аПǎ:汪庆玲,、斡胄募∷.篴。,,:珻,,.琇瓵:.甈:—.琓—琗.—.,,,珻.:—,,—珼甆,—..瓹琓.—万方数据琖://.”,’,.;—,.:.,.,琺琎,一,,,,,,.瓵;,,瑂,,一,琣籈猼猙—瑃琣籭,,——,.籆籆;;.,;.,—