下载此文档

一种发酵过程中添加过氧化氢生产γ-聚谷氨酸的方法.docx


文档分类:行业资料 | 页数:约8页 举报非法文档有奖
1/8
下载提示
  • 1.该资料是网友上传的,本站提供全文预览,预览什么样,下载就什么样。
  • 2.下载该文档所得收入归上传者、原创者。
  • 3.下载的文档,不会出现我们的网址水印。
1/8 下载此文档
文档列表 文档介绍
该【一种发酵过程中添加过氧化氢生产γ-聚谷氨酸的方法 】是由【开心果】上传分享,文档一共【8】页,该文档可以免费在线阅读,需要了解更多关于【一种发酵过程中添加过氧化氢生产γ-聚谷氨酸的方法 】的内容,可以使用淘豆网的站内搜索功能,选择自己适合的文档,以下文字是截取该文章内的部分文字,如需要获得完整电子版,请下载此文档到您的设备,方便您编辑和打印。一种发酵过程中添加过氧化氢生产γ-聚谷氨酸的方法一种发酵过程中添加过氧化氢生产γ-聚谷氨酸的方法本发明公开了一种发酵过程中添加过氧化氢生产γ-聚谷氨酸的方法,该方法采用在发酵48h时添加一定浓度的氧载体过氧化氢(-5%,v/v)到发酵液中,提高溶氧浓度,进而提高γ-聚谷氨酸的产量,同时也控制了γ-聚谷氨酸中L-谷氨酸和D-谷氨酸的比例。该方法使得γ-聚谷氨酸的产量得到了很大的提高,而且也控制了其构型的比例,使所制得的不同构型γ-聚谷氨酸按照各自不同特点分别应用到化妆品、环境保护、食品、医药、农业、沙漠治理等领域。【专利说明】一种发酵过程中添加过氧化氢生产Y-聚谷氨酸的方法【技术领域】[0001]本发明涉及一种Y-聚谷氨酸的生产方法,特别涉及一种发酵过程中添加过氧化氢生产Y-聚谷氨酸的方法。【背景技术】[0002]y-聚谷氨酸是由D-谷氨酸和L-谷氨酸通过α-氨基和、-羧基间的酰***键结合而成的一种多功能生物可降解高分子材料。[0003]分子量分布在IOOkDa到1000OkDa之间。Y-聚谷氨酸具有优良的水溶性、超强的吸附性和生物可降解性,降解产物为无公害的谷氨酸,是一种优良的环保型高分子材料,可作为保水剂、重金属离子吸附剂、絮凝剂、缓释剂以及药物载体等,在化妆品、环境保护、食品、医药、农业、沙漠治理等产业均具有很高的商业价值和社会价值。[0004]从聚谷氨酸的发现至今仅有几十年的历史,聚谷氨酸的研究主要还是处于实验室阶段,主要包括对其性质的研究,产生菌的改良和基因研究,发酵过程研究和提取纯化过程研究,以及衍生物的生产和性质的研究。近几年来,由于人们环境意识的增强和国家可持续发展战略的要求,发展对环境友好的材料和开发改善环境问题的产品成为一种产业上的趋势,它也推动了聚谷氨酸产业化研究和探索的进程。进入本世纪,个别国际知名公司开始进行聚谷氨酸的生产和应用的研究,国内部分大学和研究所也积极开展了相关的研究,国内更有数家企业开始计划聚谷氨酸的大规模生产。由于这些产业化研究的跟进,使得聚谷氨酸成为现阶段最受人关注的生物制品之一。[0005]不同构型组成的Y-聚谷氨酸有不同的应用,例如,含有较高含量L-谷氨酸的Y-聚谷氨酸因其对皮肤的兼容性在化妆品行业应用广泛,在一些其他的领域,含有较高D-谷氨酸的Y-聚谷氨酸因其降解较慢而被广泛应用。这使得在Y-聚谷氨酸生产过程中控制其构型组成以满足不同的应用需求变得很重要。[0006]Y-聚谷氨酸的构型以及组成随着菌株和培养条件的不同而不同。炭疽芽孢杆菌特异性可以生产出D-Glu构型的Y-聚谷氨酸;采用地衣芽孢杆菌生产Y-聚谷氨酸,其会随着锰离子浓度的不同而得到D-Glu含量10~100%的不同Y-聚谷氨酸;采用枯草芽孢杆菌也可以生产不同类型的Y-聚谷氨酸。[0007]利用添加氧载体过氧化氢来提高Y-聚谷氨酸的产量,同时控制其构型的比例尚未见报道。【发明内容】[0008]本发明的目的是提供一种Y-聚谷氨酸的生产方法,特别是提供一种发酵过程中添加过氧化氢生产Y-聚谷氨酸的方法。采用本发明所述生产方法生产Y-聚谷氨酸,不但Y-聚谷氨酸的产量有所提高,Y-聚谷氨酸聚合物中L型谷氨酸和D型谷氨酸的比例也能得到控制。[0009]本发明的技术方案如下:[0010]本发明采用地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)生产Y-聚谷氨酸。菌种来源:发明所用菌种见天津北洋百川生物技术有限公司申请专利名称为惰性载体固态发酵法生产Y-聚谷氨酸的方法专利,申请号=200910228297。该菌种为地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis),现已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,3336。[0011]—种发酵过程中添加过氧化氢生产Y-聚谷氨酸的方法,在发酵48h时,将一定体积百分浓度的过氧化氢(%_5%)添加到发酵液中,提高了溶氧浓度,进而提高了Y-聚谷氨酸的产量,并控制了Y-聚谷氨酸的构型。[0012]D-谷氨酸与L-谷氨酸浓度的测定:高效液相色谱(HPLC)[0013]仪器:Agilentl200高效液相色谱仪(配紫外可见检测器和工作站)。[0014]色谱柱:大赛璐CR(+)/(CR-)手性柱;[0015]流动相:***酸水溶液;[0016]流速:;[0017]柱温:25O;[0018]检测波长:UV200nm[0019]样品制备:发酵液经二次醇沉复溶后,与等体积6mol/L盐酸在110°C进行水解,水解前样品用流动相稀释适当倍数,水解后样品用流动相稀释适当倍数,,滤液供液相色谱分析。[0020]有益效果:[0021]利用本发明所述的Y-聚谷氨酸生产方法来生产Y-聚谷氨酸,其Y-聚谷氨酸的产量得到显著提高,该方法可以同时控制Y-聚谷氨酸中L/D谷氨酸的比例,因此可以得到不同用途的Y-聚谷氨酸。【具体实施方式】[0022]下面通过具体的实施方案叙述本发明中Y-聚谷氨酸的生产方法。除非特别说明,本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外,实施方案应理解为说明性的,而非限制本发明的范围,本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言,在不背离本发明实质和范围的前提下,对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。[0023]对照实验:[0024]:在富含营养的固体培养基斜面上于37°C培养16小时,制备得到成熟的斜面种子,固体培养基的成分包含:蛋白胨10g/L,酵母粉5g/L,NaCllOg/L,琼脂20g/L,;[0025]:[0026]将一环上述种子转入装有液体种子培养基的三角瓶中,37°C,220rpm培养16小时至对数生长期;[0027]种子液培养基组成(g/L):葡萄糖30;酵母膏7;胰蛋白胨10;;,;500ml的三角瓶中分装50ml培养基;[0028]:[0029]发酵罐培养基成分为(g/L):葡萄糖80,谷氨酸钠80,***铵18,NaCllO,,,,,,,,,谷氨酰***,,;[0030]发酵条件:5L发酵罐装液量为3L,种子液的接种量为10%,发酵温度37°C,发酵时间72小时,[0031],转速400rpm,;发酵结束后经检测Y聚谷氨酸的产量为18g/L。Y-聚谷氨酸中L-谷氨酸与D-谷氨酸含量比例为1:1。[0032]实施例1[0033]发酵罐发酵采用氧载体添加策略,其余条件同对照实施例。%(v/v)0[0034]结果:Y-聚谷氨酸产量由对照组的18g/L提高到25g/L。L/D构型比例为1:2。[0035]实施例2[0036]发酵罐发酵采用氧载体添加策略,其余条件同对照实施例。发酵48h时添加过氧化氢1%(v/v)0[0037]结果:Y-聚谷氨酸产量由对照组的18g/L提高到28g/L。L/D构型比例为4:5。[0038]实施例3[0039]发酵罐发酵采用氧载体添加策略,其余条件同对照实施例。发酵48h时添加过氧化氢2%(v/v)0[0040]结果:Y-聚谷氨酸产量由对照组的18g/L提高到30g/L。L/D构型比例为6:5。[0041]实施例4[0042]发酵罐发酵采用氧载体添加策略,其余条件同对照实施例。发酵48h时添加过氧化氢5%(v/v)0[0043]结果:Y-聚谷氨酸产量由对照组的18g/L提高到20g/L。L/D构型比例为1:3。【权利要求】-聚谷氨酸的方法,包括如下步骤:(1)3336菌种的活化:在富含营养的固体培养基斜面上于37°C培养16小时,制备得到成熟的斜面种子,固体培养基的成分包含:蛋白胨10g/L,酵母粉5g/L,NaC110g/L,琼脂20g/L,;(2)种子液的制备:将一环上述种子转入装有液体种子培养基的三角瓶中,37°C,220rpm培养16小时至对数生长期;所述种子液培养基组成为:葡萄糖30g/L;酵母膏7g/L;胰蛋白胨10g/L;;,;500ml的三角瓶中分装50ml培养基;(3)发酵罐发酵:发酵罐培养基成分为:葡萄糖80g/L,谷氨酸钠80g/L,***铵18g/L,NaC110g/L,,,,,,,,,谷氨酰***,,;发酵条件:5L发酵罐装液量为3L,种子液的接种量为10%,发酵温度37°C,发酵时间72小时,在发酵48h时,%-5%的过氧化氢添加到发酵液中,,转速400rpm,。-聚谷氨酸的方法,其特征在于,在发酵罐发酵至48h时,添加过氧化氢,%体积百分浓度。-聚谷氨酸的方法,其特征在于,在发酵罐发酵至48h时,添加过氧化氢的体积百分浓度为1%。-聚谷氨酸的方法,其特征在于,在发酵罐发酵至48h时,添加过氧化氢的体积百分浓度为2%。-聚谷氨酸的方法,其特征在于,在发酵罐发酵至48h时,添加过氧化氢的体积百分浓度为5%。

一种发酵过程中添加过氧化氢生产γ-聚谷氨酸的方法 来自淘豆网www.taodocs.com转载请标明出处.

相关文档 更多>>
非法内容举报中心
文档信息
  • 页数8
  • 收藏数0 收藏
  • 顶次数0
  • 上传人开心果
  • 文件大小19 KB
  • 时间2024-04-17