一种利用放线菌发酵生产卡拉霉素的培养基的制作方法.docx

该【一种利用放线菌发酵生产卡拉霉素的培养基的制作方法 】是由【开心果】上传分享，文档一共【4】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【一种利用放线菌发酵生产卡拉霉素的培养基的制作方法 】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。一种利用放线菌发酵生产卡拉霉素的培养基的制作方法专利名称:一种利用放线菌发酵生产卡拉霉素的培养基的制作方法技术领域:本发明涉及微生物聚***类化合物转化培养基,具体涉及一种用于生物合成卡拉霉素的放线菌发酵培养基。背景技术:卡拉霉素属广谱抗菌素,对革兰阳性,阴性细菌都有抑菌作用,用于大肠杆菌,产气杆菌,肠炎杆菌,痢疾杆菌,肠炎球菌,耐药性葡萄球菌等引起的感染。还广泛用于对青霉素G耐药的金黄色葡萄球菌所引起的各种感染,如败血症、心内膜炎、尿路感染、肺部感染等,以及对链霉素耐药的结核杆菌所致的各种感染。尤其近年来研究发现卡拉霉素是肿瘤·靶点AKT抑制剂,具有抗肿瘤的作用,因此成了药物研发热点。目前工业生产上均采用传统的培养基及菌种生产卡拉霉素,其转化率低,生产率低,难以满足市场的需求,因此现急需一种高效的转化工艺,提高底物的转化率,降低生产成本。发明内容为解决上述技术问题,本发明的目的是提供一种以放线菌M097为菌种,生物合成卡拉霉素的发酵培养基,包含氮源、碳源、无机盐和金属离子。所述的氮源包括有机氮源和无机氮源;有机氮源为酵母提取物,含量为8g/L;无机氮源为***钾,其含量为2g/L。所述的碳源为可溶性淀粉和葡萄糖,其含量为60g/L。培养基中还加入钾盐、磷酸盐、铵盐和***盐等无机盐和镁等金属离子。不同有机氮源对转化的影响显著,实验考察了花生粉饼、豆柏、豆饼粉、牛肉膏和蛋白胨五中常用有机氮源,添加浓度均为8g/L,底物投料浓度相同,转化结束后通过HPLC检测各有机氮源发酵液中产物的浓度,其中牛肉膏、蛋白胨和酵母提取液中的产物含量较闻,而酵母提取液的最闻。不同碳源对转化也具有的显著影响,实验考察了可溶性淀粉、葡萄糖、糊精、玉米粉和蔗糖等碳源,添加浓度均为60g/L,底物投料浓度相同,转化结束后通过HPLC检测各有碳源发酵液中产物的浓度,其中可溶性淀粉和葡萄糖中的产物含量较高。采用本发明发酵培养基和菌种合成卡拉霉素时,转化率可达85%,而采用现有技术的发酵培养基和菌种时,转化率具体实施例方式实施例1发酵用液体种子培养基配方(g/L):玉米淀粉9,,,***,蛋白胨6,酵母提取物I。,121°C灭菌30分钟。液体发酵培养基配方(g/L):酵母提取物8,,,***,豆饼浸出物5,ρΗ7·0,121°C灭菌30分钟。发酵培养将10%活化放线菌M097液体菌种接入种子罐,搅拌均匀,,与26°C温度下培养20h备用;将种子罐内培养好的液体种子按10%的接种量接入发酵培养基中搅拌发酵48h备用,,发酵温度26°C,发酵过程鼓入无菌空气,-。发酵液采用超临界CO2萃取分离,离心取上清用HPLC进行分析,采用外标法对样品进行定量,计算转化率为85%。HPLC条件为=LC-1OAD型高效液相色谱仪;色谱柱XDB-C18(,5μm);流动相为甲醇:水=7030;;进样量10μI;检测波长240nm。上述实施例不作为对本发明的限定,凡在本发明的范围内所作的任何修改、等同替换、改进等,均属于本发明的保护范围。,生物合成卡拉霉素的发酵培养基,包含氮源、碳源、无机盐和金属离子,其特征在于,所述的氮源包括有机氮源和无机氮源,有机氮源为酵母提取物。,其特征在于,所述的有机氮源的含量为8g/L。,其特征在于,所述的无机氮源为***钾,其含量为2g/L。,其特征在于,所述的碳源为可溶性淀粉和葡萄糖,其含量为60g/L。全文摘要本发明公开了一种以放线菌MO97为菌种,生物合成卡拉霉素的发酵培养基,包含氮源、碳源、无机盐和金属离子,所述的氮源包括有机氮源和无机氮源,采用本发明发酵培养基合成卡拉霉素时,其转化率可达85%,可以很好的解决目前卡拉霉素产率低的问题。