食用菌液体种深层发酵成套制种工艺及其培养基配方的制作方法.docx

该【食用菌液体种深层发酵成套制种工艺及其培养基配方的制作方法 】是由【开心果】上传分享，文档一共【18】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【食用菌液体种深层发酵成套制种工艺及其培养基配方的制作方法 】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。食用菌液体种深层发酵成套制种工艺及其培养基配方的制作方法食用菌液体种深层发酵成套制种工艺及其培养基配方的制作方法本发明提供一种食用菌液体种深层发酵成套制种的培养基配方,其包括摇瓶种培养基配方及发酵罐种培养基配方。该摇瓶种培养基配方主要加入马铃薯淀粉,用以取代传统摇瓶种培养基配方中的马铃薯切片。该发酵罐种培养基配方主要加入马铃薯淀粉,用以取代传统发酵罐种培养基配方中的玉米面、豆粕、麸皮等物质。本发明还提供一种使用上述配方的食用菌液体种深层发酵成套制种工艺。上述技术方案主要是引入马铃薯淀粉,摇瓶种和发酵罐种的培养基配方相似,且在制种过程中便于观察、菌种质量均衡、原料易于处理、利用率较高。【专利说明】食用菌液体种深层发酵成套制种工艺及其培养基配方【技术领域】[0001]本发明涉及一种食用菌制种工艺及其培养基配方,尤其涉及一种食用菌液体种成套制种工艺及其培养基配方。【背景技术】[0002]食用菌中含有生物活性物质如:高分子多糖、β一葡萄糖和RNA复合体、天然有机锗、核酸降解物、环状核苷酸cAMP和三萜类化合物等对维护人体健康有重要的利用价值。以食用菌为原料生产加工的保健食品、保健饮料、酒及药品大量用于医疗临床及投入保健品市场。因此,食用菌作为一种绿色食品日益受到各国人民的重视。所以,食用菌的需求量也越来越大,食用菌的制种栽培技术也受到极大的重视。[0003]食用菌菌种的制作是食用菌生产工业化的重要技术之一。现有的食用菌液体菌种制作技术主要包括试管种、摇瓶种、发酵罐种三个阶段;其中摇瓶种和发酵罐种的制作方面存在配方差异大、不便观察、菌种质量不均衡、原料处理难度大、利用率低等问题。【发明内容】[0004]由鉴于此,确有必要提供一种能够克服上述问题的食用菌液体种深层发酵成套制种的培养基配方及制种工艺。[0005]本发明的技术方案主要是将马铃薯淀粉引入深层发酵成套制种的培养基配方中,使摇瓶种和发酵罐种的培养基配方相似,以解决食用菌摇瓶种和发酵罐种制作方面存在的配方差异大、不便观察、菌种质量不均衡、原料处理难度大、利用率低等问题。[0006]为了达到上述目的,本发明提供一种食用菌液体种深层发酵成套制种的培养基配方,包括:食用菌试管种培养基配方、食用菌摇瓶种培养基配方及食用菌发酵罐种培养基配方,其中,所述摇瓶种培养基配方包括:每1200毫升蒸馏水中含赤砂糖15克(g广20g,葡萄糖15g~20g,马铃薯淀粉5g~7g,蛋白胨5g~7g,~,~,~,***~;所述发酵罐种培养基配方为:每800升水中含蔗糖粉3千克(kg广5kg,赤砂糖2kg~4kg,~Ikg,马铃薯淀粉2kg~3kg,~,~,磷酸二氢钾200g~300g,硫酸镁100g~150g,消泡剂80g~120g,菜籽油500ml,2包麸皮料包Ikg/包。[0007]基于上述食用菌液体种深层发酵成套制种的培养基配方,所述试管种培养基配方为:马铃薯280g~320g于1500毫升蒸馏水中煮汁,^,~,~,~,***~,维生素B1粉末90mg~llOmg,~。[0008]基于上述,所述食用菌包括杏鲍菇、金针菇、香菇、姬菇、平菇、秀珍菇等。食用菌的菌种在制作过程中,需要控制PH值。食用菌的种类不同,需要控制的pH值的范围也不同。如,当食用菌为香菇时,则需在摇瓶种的配方中加入一定量的氢氧化钠,-,如,;当食用菌为杏鲍菇时,则不需要另外调节PH值,使用上述的各配方的培养基的pH值足以用于培养杏鲍菇菌种。[0009]本发明还提供一种使用上述食用菌液体种深层发酵成套制种的培养基配方的制种工艺,包括:试管种制作工艺;摇瓶种制作工艺,包括:(21)将上述摇瓶种培养基配方中的组分溶于1200毫升水中形成一培养基溶液,并将该培养基溶液装入摇瓶中并封口;(22)对所述装有培养基的摇瓶进行灭菌、冷却处理;以及(23)将食用菌试管种接入冷却后的摇瓶种培养基中培养,并培养成食用菌摇瓶种;发酵罐种制作工艺,使用容积为1000升的发酵罐,包括:(31)将上述发酵罐种培养基的配方中的各组分溶解于发酵罐中以制备发酵罐种培养基;(32)对含有发酵罐种培养基的发酵罐进行灭菌、冷却处理;以及(33)将食用菌摇瓶种接入上述发酵罐中培养成发酵罐种,并接种入袋。[0010]基于上述,所述步骤(22)包括以下分步骤:(221)将所述装有培养基的摇瓶置于121°C~123°C下高压灭菌35~40分钟,其中,可以在高压灭菌锅中进行灭菌处理;以及(222)对灭菌后的摇瓶种培养基进行高风吹淋处理;具体地,取出灭菌后的摇瓶种培养基并置入超净工作台内,以高风吹淋促进尽快冷却,缩短冷却时间,可以在减少营养成分破坏的同时降低污染风险。[0011]基于上述,所述步骤(23)包括以下分步骤:(231)当摇瓶温度降至20°C时,采用紫外照射接种室及超净工作台45~55分钟以减少空间杂菌基数、降低污染风险;(232)将试管种切割成绿豆大小的菌种块,每瓶摇瓶培养基中接入5~7块试管种菌种中;(233)将接种后的摇瓶在超净台内静置48~72小时至培养基仍然保持澄清状态,且无异常情况出现,如气泡、变浑浊;以及(234)于恒温20-22°C搅拌培养所述试管种,获得上述摇瓶种。其中,需要说明的是,在培养摇瓶种期内,摇瓶内培养基仍然保持澄清状态,没有出现气泡、变浑浊等异常情况,且菌丝生长速度正常、菌丝量逐渐增加、菌液粘度逐渐增大,即可作为摇瓶菌种使用。另外,依据食用菌种类的不同,该步骤的培养时间也不同,如杏鲍菇和香菇等可以培养51天;平菇、姬菇等可以培养4~5天。[0012]基于上述,所述步骤(31)包括以下分步骤:(311)将蔗糖粉、赤砂糖及葡萄糖溶解溶入85°C~95°C的水中形成第一原料液。[0013]具体地,将3kg~5kg鹿糖粉、2kg~~Ikg葡萄糖溶解于大约10升的温度为85°C~95°C的水中。[0014](312)将马铃薯淀粉、玉米面、蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁、消泡剂溶解于350C~55°C的温水中形成第二原料液。[0015]具体地,将2kg~3kg马铃薯淀粉、~、~、200g~300g磷酸二氢钾、100g~150g硫酸镁以及80g~120g消泡剂溶解于大约35~45升温度为35V~55°C的温水中,并多次搅拌以加速原料充分溶解,直到第二原料液中不再有团状颗粒出现。[0016](313)将上述2包麸皮料包Ikg/包置于有半罐水的发酵罐内煮汁后取出该2包麸皮料包Ikg/包,并加入第一及第二原料液制备发酵罐种培养基。[0017]具体地,将上述2包麸皮料包从发酵罐进料口加入发酵罐内,且发酵罐内有半罐温度大约为100°c的水;向发酵罐内通入温度为123°C~126°c蒸汽加热该发酵罐,当发酵罐内液体处于沸腾状态时,即接种口阀门处有持续直冲向上的大汽时,停止向发酵罐通入蒸汽,向发酵罐体通入洁净冷空气;然后从发酵罐中取出麸皮料包,将所述第一及第二原料液送到发酵罐内,得到所述发酵罐种培养基;当该第一及第二原料液向发酵罐内输送完毕后,封闭该发酵罐;其中,该发酵罐内必须扣紧,否则后续冷却过程中会引起倒吸污染。[0018]基于上述,所述步骤(32)包括以下分步骤:(321)向发酵罐通入蒸汽以增加发酵罐的压力,;其中,发酵罐内的冷气必须彻底排出,否则容易造成发酵罐灭菌不彻底,从而引起污染;(322),排出过滤器内的冷凝水为过滤器灭菌,、.05Mpa时,停止向发酵罐通入蒸汽;(323)过滤器灭菌约20-25分钟后,向发酵罐通入洁净冷空气以吹干过滤器;同时排出发酵罐的蒸汽以降压;以及(325)-,微微开启发酵罐的下阀门排料30-60秒;排料完成,即通入冷却水冷却。[0019]基于上述,所述步骤(33)包括以下分步骤:(331)当发酵罐内培养基冷却至20°C~25°C时,停止通入冷却水;将甲醛棉球塞在发酵罐接种口内,在其外侧用铜丝固定一团99%的酒精棉条;点燃酒精棉条,在火焰保护下,将摇瓶种接入发酵罐内的培养基中;(332)在发酵罐的温度维持在20°C~22°C时,培养摇瓶种5~7天长成发酵罐种;其中,在发酵罐种生长期间,未出现异味、变色、菌丝消融等情况,经过无菌取样、显微镜镜检确认合格,则可作为生产用种、接种入袋;以及(333)采用温度为110°C~115°C的蒸汽为接种管道和接种枪灭菌8_12分钟,然后接种入袋。[0020]另外,当接种入袋完之后,还进一步包括向发酵罐继续增压以去除剩余的菌种,用水管冲洗罐内、尤其是视镜口、盘管上及进料口上部等位。[0021]基于上述,所述试管种制作工艺包括以下步骤:(11)制作试管种培养基:将280g~320g马铃薯切片,并于1500ml蒸馏水中煮汁,过滤并保留马铃薯滤液;^,^,~,~,***~,维生素81粉末9011^~11011^并搅拌至充分溶解得到试管种培养基预混液;在300°C恒温下,^;(12)将所述试管种培养基分别注入试管内,塞紧试管口;并于121°C~123°C下对该试管进行高压灭菌处理25~30分钟;其中,可以采用注射器将试管种培养基注入试管内;(13)摆斜面、冷却;(14)向每支试管种培养基分别接入食用菌组织分离种块I块,并在22V~24°C下培养该组织分离种块至即将长满试管,作为第一试管种;其中,依据食用菌种类的不同,培养组织分离种的时间也不同,如杏鲍菇与金针菇需培养12~15天,香菇需培养15~20天,平菇种属需培养10-13天;(15)对上述第一试管种进行试管种转管扩繁处理,并在22°C~24°C下再培养该第一试管种,作为第二试管种,用作摇瓶种的出发种;同样,依据食用菌种类的不同,试管种转管扩繁的再培养时间也不同,即,培养第一试管种的时间也不同,如杏鲍菇与金针菇需培养再12~15天,香菇需培养15~20天,平菇种属需培养10-13天。优选地,在菌丝即将满试管时,从中挑出无杂染、洁白浓密、尖端整齐、长速适中的试管种,即可作为摇瓶种的出发种使用。[0022]可以理解,依据食用菌的具体种类的不同,具体的制种工艺也有差异,如在制作香菇摇瓶种过程中,需要在步骤(21)-;如,。[0023]本发明提供的食用菌液体种深层发酵成套制种的培养基配方及制种工艺相对现有技术具有以下优点:首先,食用菌摇瓶种及发酵罐种培养基的配方中都引入马铃薯淀粉,马铃薯淀粉易溶于水,马铃薯淀粉的引入去除了传统的马铃薯削皮、切片、煮汁等环节,简化传统食用菌液体菌种培养基制作过程。[0024]其次,食用菌摇瓶种及发酵罐种培养基的配方中都引入马铃薯淀粉,并以马铃薯淀粉作为制种食用菌菌种的淀粉类原料,与传统的玉米粉、豆柏粉等大颗粒淀粉类原料相t匕,马铃薯淀粉的引入提高了培养基原料的透明度和可观察性,有利于在液体种深层发酵成套制种工艺中第一时间发现污染情况。[0025]再次,相较于玉米粉、豆柏粉等以直链淀粉为主要成分的原料,马铃薯淀粉主要是分子结构上更加稀松的支链淀粉,这使得在淀粉水解过程中,氢质子更加容易进入淀粉分子内部进行反应,从而大大缩短了淀粉水解为葡萄糖从而被菌丝细胞吸收利用的时间;而且在相同制种条件下,使摇瓶种及发酵罐种达到100%密度的时间缩短了f3天,提高摇瓶种和发酵罐菌种菌龄的一致性,接种入菌棒后,使发菌满袋时间缩短了7~13天。[0026]进一步,食用菌试管种及摇瓶种的培养基的配方中都引入***化钙,尤其是试管种培养基配方中引入***化钙可以补充食用菌的钙,使食用菌外观好。【具体实施方式】[0027]下面通过【具体实施方式】,对本发明的技术方案做进一步的详细描述。[0028]实施例1一杏鲍菇液体种成套制种的培养基配方的制种工艺A、杏鲍菇试管种培养基配方及其制种工艺配方马铃薯300g于1500毫升蒸馏水中煮汁、葡萄糖30g、蛋白胨5g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁lg、***、维生素BI