美国及欧洲药典系统适应性要求.docx

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分析需要选择适宜的色谱柱。一般文件会明确规定一些重要参数以满足系统适应性。薄层色谱和纸色谱展开剂的组成:对其中较少的组分,调整范围为相对差值±30%或绝对差值±2%,可选其中较大的一种,但任何组分的绝对差值不得超过±10%。例如含量为10%的组分,按相对差值±30%计算其可调范围在7%-13%,按绝对差值±2%计算可调范围在8%-12%,固可按相对差值计算的范围来调整。假设一组分含量为5%,-%,按绝对差值计算其可调范围在3-7%,此时可按绝对差值范围调整,但是改变范围绝对不能超过10%。除非另有规定,流动相水相pH值可调范围在±,非离子溶剂可调范围在±1个单位。缓冲溶液中的盐浓度可调范围在±10%。点样体积:如果薄层板或层析纸的粒度良好〔2-10μm〕,点样体积可为规定的10-20%液相色谱:等度洗脱流动相组成:对其中较少的组分,调整范围为相对差值±30%或绝对差值±2%,可选其中较大的一种,但任何组分的绝对差值不得超过±10%。除非另有规定,流动相水相pH值可调范围在±,非离子溶剂可调范围在±1个单位。缓冲溶液中的盐浓度可调范围在±10%。流速:一般可在±50%范围内调整,如果改用大尺寸的柱子,调整范围可适当加大。色谱柱参数固定相:不能改变固定相填料类型〔例如不能用C8柱替换C18柱〕粒径:最多可将粒径减小到原来的50%,但是不能增加填料粒径色谱柱尺寸:长度:可调范围±50%内径:可调范围±25%如果色谱柱尺寸改变,流速也需按以下公式做适当调整:F2=F1F1:方法中规定的流速,单位ml/minF2:改变后的流速,单位ml/minl1:方法中规定的柱长,单位mml2:改变后的柱长,单位mmd1:方法中规定的柱内径,单位mmd2:改变后的柱内径,单位mm柱温:±10℃,除非另有说明,操作时的柱温需明确规定检测波长:不能改变进样体积:在满足检测限和重现性的情况下可减少进样体积,但不能增加进样体积液相色谱:梯度洗脱梯度洗脱不像等度洗脱,要改变洗脱条件的话需要慎重考虑流动相:只有在满足以下条件时才可对流动相组成做微小调整:满足系统适应性要求主峰的洗脱时间改变范围不超过方法中规定的±15%改变后的流动相洗脱能力不能比方法中规定的差如果改变条件不能满足系统适应性要求,那么需考虑滞留体积和换色谱柱滞留体积:实验仪器的布局能显著改变别离度、保存时间和相对保存时间等。如有此情况,可能是滞留体积过大。在开始梯度洗脱程序之前,会有一段等度洗脱过程。考虑到规定的方法与实际使用方法中的滞留体积有差异,可在等度洗脱时调整开始梯度洗脱的时间。测试员有责任使等度洗脱时间适应所用的分析仪器。如果方法中规定了滞留体积,梯度洗脱的开始时间可根据下面公式换成实际开始时间:tc=t-D:滞留体积,单位mlD0:实际滞留体积,单位mlF:流速,单位ml/min如果没有等度洗脱这个步骤也不影响数据的有效性,那么此步骤可以省略流动相pH,不能改变缓冲液盐浓度:不能改变流速:色谱柱尺寸改变时可改变流速〔公式见前面〕色谱柱参数固定相:不能改变填料类型不能改变粒径大小