胶体金试纸条检测技术.pptx

胶体金试纸条诊断技术
一、简介
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析技术研制而成,该技术是90年代初在免疫渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫学检测技术,最先用于人绒毛膜促性腺激素(HCG)的测定和乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)等检测。
胶体金(Colloidal gold)是***金酸(HAuCl4)的水溶胶,***金酸在还原剂的作用下,聚合成特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态。
zeta电位可以使胶体金颗粒之间相互排斥,以维持胶体金的稳定状态。
基础金核
双离子内层负离子(AuC12-) zeta电位
外层离子层 H+分散在胶体间的溶液中
胶体金颗粒对蛋白质有很强的吸附功能,而不被坏其生物活性,可以与蛋白质等(葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白)等非共价结合,形成胶体金标记物。
胶体金标记的原理:胶体金在碱性条件下带负电荷,与蛋白质分子的正电荷基团藉静电吸引而形成牢固结合。
胶体金标记技术(Immunogold labeling technique)是以胶体金作为示踪标记物应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
二、胶体金试纸条诊断技术的原理
以***纤维素膜为载体,利用了微孔膜的毛细血管作用,滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端渗移,通过抗原抗体结合,并利用胶体金呈现颜色(红色)反应,检测抗原/抗体。有三种反应模式:夹心法,间接法,竞争抑制法。
最常用的是双抗夹心法检测抗原
胶体金试纸条示意图
检测线
质检线
吸收垫
样品垫
***纤维素膜
连接垫
(胶体金垫)
背衬
(底板)
测定时将试纸条下端浸入液体标本中,下端吸水材料即吸取液体向上端移动,流经C处时使干片上的免疫金复合物复溶,并带动其向膜条渗移。
测定