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愈伤组织诱导培养.ppt

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文档列表 文档介绍

实验一植物愈伤组织诱导培养
一、实验名称
植物愈伤组织诱导培养
二、实验目的
1、掌握MS培养基的配制方法
2、初步掌握植物外植体无菌操作的基本步骤
三、实验材料
1、芦荟
2、月季
四、主要实验器材
1、剪刀
2、解剖刀
3、长角镊子
4、超净工作台
5、9cm培养皿
6、封口膜
7、烧杯
8、吸管
9、废液缸
10、橡皮筋
五、实验步骤
芦荟
1、将准备好的芦荟幼苗在无菌中冲洗数次。
2、取茎尖部分,再冲洗1-2次,淋干,紫外灭菌30分钟
3、在超净台上,用75%的乙醇将茎尖浸泡30-60s
4、再用升***(%)浸5-l0min,最后用无菌水冲洗数次。无菌纱布吸干水份
5、用解剖刀取出茎尖生长点的组织切块,接种到愈伤组织诱导培养基上。
MS+(1一6mg/ L)BA+()NAA
苄基嘌呤(BA);萘乙酸(NAA)
6、培养条件:光照 10-12h,光照度为 1000一2000Lx,温度(25士)2℃。
月季
1、枝条切去叶,再剥去附在茎上的叶柄及皮刺。
2、清水清洗、擦干
3、2~3厘米一段,每段至少一个侧芽。
4、装入消毒过的培养皿,紫外灯灭菌30分钟。
5、用饱和漂白粉上清液作表面灭菌25~30分钟(也可使用乙醇;升***)
6、无菌水涮洗数次,无菌纱布吸干水分
7、接种到培养基上: MS+(/ L)BA
8、培养条件:光照 10-12h,光照度为 800一1200Lx,温度21-25℃。

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