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培养基配方
一、R2A/R3A培养基
配方(g/L): R2A R3A
酵母粉                g g
胰蛋白胨             g g
酪蛋白氨基酸(casamino acid)               g g
葡萄糖               g g
可溶性淀粉                g g
磷酸氢二钾          g g
七水硫酸镁               g
***酸钠             g
琼脂                g g
,加1L蒸馏水,搅拌溶解,121℃灭菌15min。
特点:
R2A培养基主要用于水的菌落计数,它可以修复被***气损伤的细菌,支持耐受***气的微生物的生长。培养要求,低温(20-30℃)长时间培养(5-7天)这样得到的菌落数比常规菌落总数检测的菌落数更符合实际。
R3A培养基主要用于菌株的生化特征描述和鉴定。
参考文献:Reasoner DJ, Geldreich EE. A new medium for the enumeration and subculture of bacteria from potable water. Appl Environ Microbiol. 1985,49(1):1-7.
二、VL55培养基(Sait M et al,2002)(土壤筛菌)
配方(g/L) 1× 2×
2-(N-吗啉基)乙磺酸 g g
MgSO4 g() g()
CaCl2 g() g()
(NH4)2HPO4 g() g()
亚硒酸盐/钨酸盐溶液 1mL 2mL
微量溶液SL10 1mL 2mL
/(这与土壤的pH一致)
Sait M等取2×的培养基121℃灭菌15min后,冷却至56℃,加入10mL5%(w/v)的木聚糖溶液,2mL的维生素溶液1,6mL的维生素溶液2。
当量3%洗过的琼脂121℃灭菌15min后,冷却至56℃,与前面培养基混匀后倒平板(Widdel F et al.,1992)。
备注:
亚硒酸盐/钨酸盐溶液(g/L):NaOH g,Na2SeO3·5H20 3mg,Na2WO4·2H20 4mg,dd H20 1L,溶解混匀,过滤除菌,4℃备用。(Tschech and Pfennig, 1984)
微量溶液SL7(g/L):25%HCl 10mL,FeCl2·4H2O ,CoCl2·6H2O ,MnCl4·4H2O ,ZnCl2 ,H3BO3 ,Na2MoO4·2H2O ,NiCl2·6H2O ,CuCl2·2H2O ,dd H20 1L,溶解混匀,过滤除菌,4℃