电镜—— 透射电镜样品的制备与观察.ppt

透射电镜样品的制备与观察

实验目的掌握透射电镜的成像原理和使用方法,超薄切片
的制备及观察.
实验内容透射电镜的基本结构
透射电镜的成像原理
透射电镜的使用方法
超薄切片的制备与观察
一、透射电镜的基本结构
电子光学系统
电子枪,磁电子透镜系列,样品室,观察和记录装置.
真空系统
供电系统
二、透射电镜的成像原理
由电子枪发出的热电子在环状正极的吸引下被加速,沿着镜筒冲下,
经聚光镜聚焦,照射到样品上,与样品发生作用,从而带有了样品的信息,
带有样品信息的电子经过物镜, 中间镜, 投影镜等电磁透镜的依次放大,
最后形成电子显微图象.
三、透射电镜的使用方法
开机调试照明系统观察与拍照换版关机
四、超薄切片的制备与观察
: 快准轻小.
: 0-4℃,戊二醛-锇酸双重固定(用缓冲液配制).
固定的目的在于使离体组织细胞尽量保持原有的形态结构.
: 用同系列缓冲液,避免残留固定液在其后固定或脱水中还原生成
组织内电子不透明沉淀物.
: 加强反差,醋酸双氧铀酒精溶液,30-60分钟.
: 用脱水剂置换样品中的游离水, 常用酒精或***.
: 使包埋剂逐步浸入细胞内,取代脱水剂,环氧丙烷/包埋剂.
: 纯包埋剂,37度过夜,45度12小时,60度48小时,将浸透好的样品
块放在胶囊或模具中,注入包埋剂包埋,经加温聚合,即成包埋块,
去胶囊,保存于干躁器中.
:
能否切出没有刀痕,没有震颤,厚薄均匀, 平整无皱折的切片
是超薄切片中的中心环节,这取决于切片机的性能,切片刀的质量
包埋块的软硬,操作者的经验与耐心.
(1) 制备支持膜
(2) 包埋块的修整
(3) 刀的制作
(4) 切片
(5) 收集切片
:
超薄切片的染色,
盐进行染色.
:
为能独立分析电镜图像和照片的资料,应掌握以下要领:
(1)正确使用放大率
(2)对组织和细胞的初步鉴定
扫描电镜样品的制备与观察
实验目的掌握扫描电镜的成像原理和使用方法,样品
的制备及观察
实验内容扫描电镜的基本结构
扫描电镜的成像原理
扫描电镜的使用方法
样品的制备及观察
一、扫描电镜的基本结构
电子光学系统
电子枪系列电磁透镜扫描装置样品室
信号检测与转换系统
信号的显示与记录系统
真空系统和供电系统
二、扫描电镜的成像原理
扫描电子显微镜(SEM)是将电子枪发射的细电子束照射在样品上, 并在
样品表面连点逐行进行光栅扫描. 入射电子将激发样品出射描述表面结构的
二次电子等信息,再经探测器收集,施以信号放大,最后成像在显像管荧光屏上,
反映出作品表面形貌的图像. 二次电子的发射量,是依赖电子束人射点的结构
状态而变化, 样品表面结构的凹凸不平, 导致了反映结构凹凸信息的二次电子
量的不同, 这样就形成了SEM图像的反差. 所以扫描电镜的图