芦丁的提取与定性.ppt

实验二
芦丁的提取与定性反应
概述
黄***类化合物广泛存在于自然界,是一类重要的天然有机化合物。其不同的颜色为天然色素家族添加了更多色彩。这类含有氧杂环的化合物多存在于高等植物及羊齿类植物中。
黄***类化合物在花、叶、果等组织中多以苷的形式存在,而在木部坚硬组织中,多以游离苷元形式存在。
黄***苷类虽有一定极性,可溶于水,但却难溶于酸性水,易溶于碱性水,故可用碱性水提取,再将碱水提取液调成酸性,黄***苷类即可沉淀析出。此法简便易行,芦丁、橙皮苷、黄芩苷提取都应用此法。
芦丁的提取与定性反应
一实验目的
实验目的:
通过芦丁的提取与精制掌握碱-酸法提取黄***类化合物的原理及操作
通过芦丁结构的检识,了解苷类结构研究的一般程序和方法
了解UV及NMR在黄***类化合物结构鉴定中的应用
实验要求
获得三个化合物:芦丁、槲皮素、芦丁的全乙酰物
能根据化学实验及UV、NMR数据初步推断出芦丁的结构。并对黄***类化合物的结构测定有一般性的了解
芦丁的提取与定性反应
芦丁广泛存在于植物中,现已发现含芦丁的植物达70种以上,本实验以槐花米为原料提取芦丁。
由槐米提取芦丁的方法有水或醇浸提法,热、冷碱浸提酸沉法,每法各有优缺点。前者所需时间长,后者有一定水解产物存在。为克服这些缺点,已多采用超声提取,利用强力超声波发生“空化”现象的瞬间所产生的强大冲击力,使药材组织中的分子在不被破坏结构的情况下,更快的与组织剥离,继而分散溶解在溶剂中,从而提高溶出的速度和溶出率
(1)利用芦丁可溶于热水,难溶于冷水的性质进行提取;再利用芦丁在热乙醇和冷乙醇中溶解度差异较大的性质进行精制。
(2)利用芦丁可被稀酸水解,生成苷元和糖,通过纸色谱和薄层色谱进行检识
槲皮素
芦丁
芦丁十乙酰化物
芦丁的提取与定性反应
三、实验试剂与器材
实验材料:槐米、槲皮素和芦丁标准品
试剂:蒸馏水、碳酸钙、浓盐酸、镁粉、pH试纸、1%氢氧化钠、浓硫酸、α-萘酚试剂、50%乙醇、1%三***化铝-甲醇试剂、1%醋酸镁-甲醇试剂、1%槲皮素标准品;1%芸香甙标准品、正丁醇、冰醋酸、水、苯***-邻苯二甲酸试剂、石灰乳、硼砂。
仪器:500ml烧杯、研磨、脱脂棉、滤纸、布氏漏斗、吸滤瓶、广口瓶、试管、玻璃棒、200mL烧杯、100mL烧杯、滴管、硅胶薄层板、量筒、层析缸、硅胶薄层板、循环水多用真空泵电子天平、电热套等。
四、实验流程
搅拌下加入石灰乳
加水300ml
槐花米(15g)
调节PH8-9
直火加热
保持微沸30min
双层滤纸趁热抽滤
滤液
残渣
在60-70度下,用浓盐酸调PH3-4
静置
提取
芦丁的提取与定性反应
定性反应
盐酸-镁粉反应
将样品溶于1ml乙醇,加入少许镁粉振摇,滴加几滴浓盐酸,1-2min内,观察颜色变化。
Molish反应
将样品溶于1ml乙醇,加入等体积10%α-萘酚溶液,倾斜试管,摇匀,沿管壁滴加浓硫酸,注意观察两界面产生的变化。
黄***母核
苷类
芦丁的提取与定性反应
黄***苷的水解
第一次实验所得滤液
滤液
沉淀(粗品芦丁)
均分2份
重结晶
水解
抽滤
按1:60量加入蒸馏水,沉淀悬浮于蒸馏水中,加热煮沸15分钟后,趁热抽滤
残渣
滤液
冷却,静置
精制芦丁(备用)
按1:70量加入2%硫酸,加热40min,放冷静置,抽滤
沉淀
滤液
干燥
槲皮素(备用)
糖鉴定
芦丁的提取与定性反应