[硕士论文]鱼藤酮在帕金森病发病机制中的实验研究.pdf

上海第二医科大学
硕士学位论文
鱼藤酮在帕金森病发病机制中的实验研究
姓名:戚辰
申请学位级别:硕士
专业:神经病学
指导教师:刘振国
20050501
鱼藤酮在帕金森病发病机制中的实验研究中文摘要琍是一种常见的中老年人进行性神经系统变性疾病,其主要病理特征是黑质致密部多巴胺能神经元显著缺失;黑质和蓝斑区形成路易小体4蠖嗍⒃诨颊叩牟∫蛏胁幻髁耍肪因素一直是人们关注的焦点。谆鵢交,,凰那馀堑谝个被证实有中枢能神经元毒性的外源性化学物质,但仅存在于海洛因等毒品中,日常生活接触少。鱼藤酮是由植物毛鱼藤根中提取的一种化学物质,目前广泛应用于农业除害。研究显示鱼藤酮与发病密家族性与遗传因素有关,目前至少有三种单基因突变家族性被发现。其中Ⅱ.蛲槐浜螅湟斓鞍拙奂⒃诎谛纬砂濉N蘼凼故伍。赡茉赑发病过程中起重要作用。研究显示鱼藤酮能引起黑质神经元内Ⅱ.阳性的聚集物形成,但具体机制尚不明确,这显示可能是遗传因素和环境因素共同作用的结果。因此研究鱼藤酮的致病机制对于预防和治疗具有重要意义。本潺题在此基础上利用鱼藤酮建立了的细胞模型,研究鱼藤酮与细胞凋亡及氧化应激的相关性,同时应用单胺氧化酶种萍了纠醇@观察其拮抗鱼藤酮的毒性及保护细胞的作用。本课题分三部分。第一部分:研究鱼藤酮对多巴胺能神经元的神经毒性作用。选用细胞作为多巴胺能神经元的细胞模型,通过四甲基偶氮唑盐法觳夥ㄈ范合适的鱼藤酮浓度,作用于细胞后,经用流式细胞仪、荧光显微镜检测细胞凋亡:用觳鈖、、等凋亡蛋白表达。第二部分:检测鱼藤酮处理后细胞内线粒体功能及活性氧的水平,研究鱼藤酮增加细胞氧化应激的作用机制。选用缅胞,通过应用台适的鱼藤酮浓度帕金森病’切相关。家族性还是散发性脑内都有路易小体,其主要成分为畇蛋白,上海第二医科大学坝二学位论文
作用于细胞,检测线粒体内膜及膜电位改变,利用流式细胞仪检测细胞内活性氧第三部分:观察司来吉兰拮抗鱼藤酮对多巴胺能神经元的毒性作用。选用式细胞仪,荧光显微镜等方法检测细胞凋亡及氧化应激的改变。成功建立了鱼藤酮诱导的细胞损伤的帕金森病细胞模型。鱼藤酮可使多巴胺能神经元细胞出现凋亡,,细胞内活性氧水平增加,并且呈浓度依赖性,细胞内出现Ⅱ.粜缘睦喟澹崾鱼藤酮致病与线粒体受损及氧化应激有关。司来吉兰可拮抗鱼藤酮的毒性作用,其机制可能是通过减少细胞内的氧化应激及抗凋亡来起到保护作用。帕金森病;鱼藤酮:凋亡;氧化应激;司来吉兰水平,并通过免疫荧光检测猻聚集。细胞,应用合适浓度的鱼藤酮后,给予一定浓度的司来吉兰,用上述结果表明:通路。丶省浚上海第二医科大学硕七学位论文
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储躲监日期:丝:兰·多学位论文作者签名:蕊砬日期:埘溃畓/学位论文独创性声明学位论文使用授权声明成果。据我所知,除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版。和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。本人所呈交的学位论文是我在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究文中作了明确说明并表示谢意。本人完全了解上海第二医科大学有关保留、使用学位论文的规定,学校有有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅。有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索。有权将学位论文的标题
第一部分:鱼藤酮对多巴胺能神经元的神经毒性作用帕金森病’琍是一种慢性进展性神经系统疾病。临床上主要表现为静止性震颤、肌强直、动作迟缓和姿势障碍。它的主要病理特征是黑质致密部多巴胺能神经元显著缺失;黑质和蓝斑区形成路易小体S捎赑∫虿幻鳎两裆形抻行У母伟旆ǎ∏榉⒄沟酵砥诨颊叱J去生活自理能力,严重损害老年人的身体健康和影响老年人的日常生活,并给家庭和社会带来经济上沉重的负担。自从年英国医生状畏现该病以来,科学家们一直致力于寻找该病的病因,作了大量的流行病学、动物模型等研究。,帕金森综合征明显增多;年,美国加州的~,,四氢吡啶...,,牟唤嗪B逡蚝笙嗉坛现症状及典型的病理表现,而且随后用在灵长类动物复制出了帕金森病是第一个被证实有中枢能神经元毒性的外源性化学物质,但在自然界中并不存在。大量的流行病学调查、实验研究以及临床病例报道等均显示,农药尤其是除草剂和杀虫剂长期暴露,可使患的风险明显增加【,。既往的研究认为,患者体内对解除某些外源性神经毒物缗