[优秀论文]FGF-2对糖尿病创面愈合的影响---组织学、细胞生物学以及信号转导机制的实验研究.pdf

上海第二医科大学
硕士学位论文
FGF-2对糖尿病创面愈合的影响---组织学、细胞生物学以及信
号转导机制的实验研究
姓名:戎柳
申请学位级别:硕士
专业:外科学(烧伤)
指导教师:陆树良
20040401
⋯组织学、细胞生物学以及信号转导机对糖尿病创面愈合的影响制的实验研究中文摘要选用盏嫉乃俜⑿虳笫竽P停ü际酢⒆橹冉⒚庖咦榛究创面愈合进程,结果显示:大鼠创面天未愈合,正常大鼠全部愈合,创糖尿病,疵婺延鲜浅<牧俅蚕窒螅⑸制可能与机体糖代谢异常、非酶促糖基化反应及其生成的等一系列的生物学变化所导致的局部微环境的改变有关。在创面愈合的网络机制中,碱性成纤维细胞生长因子一是一种能调节细胞分裂、增殖、迁移及分化的多效活性肽。研究表明,在促进糖尿病创面愈合中起重要的作用。盏嫉纳镅效应很大程度上是依赖于芴酪氨酸激酶受体桶诙缎攀狗肿,鹊鞍追肿幼槌傻墓δ苄孕藕抛5网络来实现的,该网络中不同信号转导通路的活化状态对应着各种不同的生物学效应。正常情况下,创伤后机体通过自分泌或旁分泌途径释放促使创缘细胞生长的信号,启动细胞周期,按可预见的生物学程序,启动修复细胞的增殖、分化及迁移,从而完成愈合过程。然而有关Ⅵ创面愈合过程中,的表达和功能及下游的信号转导机制研究不多。本课题拟通过不同病程大鼠模型及其烫伤模型和不同浓度葡萄糖、。晚期糖基化终末产物逋馀嘌逑担芯緿肪持蠪一泶锖凸δ艿谋浠捌浣导的下游信号通路异常变化,探讨创面难愈的机制。一、烫伤模型的建立及病理生理改变和创面愈合情况观察等手段检测诱导后堋周、堋苎L恰⑵し糁刑呛亢虯泶铮结果显示:大鼠从芷鸪鱿制し舯浔⒀L呛推し籼呛肯灾撸珹在皮肤中大量蓄积,出现不可逆性糖尿病病理改变,称之为长病程大鼠。在此基础上制作深二度烫伤模型。通过大体、染色、免疫组化等手段研面血管化降低,创面出现难愈。二、外源性俳鳧笫竽延疵嬗上海第二医科大学申请硕士学位论文
通过脏染色、’旧ā⑼干涞缇倒鄄臁⒆橹冉⒘魇较赴А创面愈合率计算等手段研究创面愈合情况。结果显示:创面炎症反应延迟、创面内皮细胞和成纤维细胞结构发生病理性改变、胶原分泌减少、细胞周期停滞、凋亡增加、刨面愈合进程缓慢,外源性可逆转上述现象,加速创面愈合。三、外源性τ枚訢躺舜疵鍲一捌涫芴宓谋泶锕媛珊凸δ艿挠跋通过免疫组化、免疫荧光双标记、组织块培养、等手段研究创面的表达和功能变化及相应受体的表达。结果显示:正常大鼠创面在烫伤后欤斐鱿次表达高峰,呈双峰型。大鼠从烫伤后天才开始高表达。大鼠烫伤前皮肤及烫伤后创面鞍姿奖泶锊⒉坏陀谡4笫螅珼笫蛋白表达与发生交联而发生糖基化,大鼠烫伤前皮肤及烫伤后创面释放哪芰ο灾陀谡4笫蟆泶锵灾陀谡4笫螅砻骰头拍芰Σ蛔悖罅縁一锌赡鼙惶腔蛐蛄蟹⑸谋涠δ苌ナВ外源性正是弥补机体有活性的不足。受体谋泶镉隖一表达相对应,但是外源性应用大鼠刨面后,、外源性τ枚愿咛恰稍ぬ逋馀嘌逑抵心谄は赴统上宋胞的信号转导通路调控。选用人脐静脉内皮细胞株细胞和原代培养的人成纤维细胞、大鼠和正常大鼠皮肤成纤维细胞为靶细胞,在体外与不同浓度葡萄糖、共同培养,再加入屯庠葱訤一稍ぃü怪孟晕⒕倒鄄欤琘旧ā旧ê蚸染色免疫荧光显微镜观察,仁侄窝芯可ぁ⒃鲋场凋亡情况,通过免疫荧光、∽铡芯縁、蛋白水平及水平的表达。结果显示:能抑制内皮细胞和成纤维细胞增殖,诱导其凋亡,使细胞周期停滞。高糖和联合培养可加重对细胞的损害。内皮细胞在高糖、环境中较成纤维细胞易受损害。培养的内皮细胞、都出现了高表达,在高糖和环境中发生糖基化。/匾斓囊种萍可抑制上述功能蛋白的高表达,降低细胞凋亡比例,但是没有启动细胞周期;外源性应用亦可抑制/母弑达,/泶锝档秃螅唤瞿芗跎俚蛲觯夷艽俳赴芷诘钠舳R陨上海第二医科大学申请硕士学位论文
关键字:创面愈合糖尿病晚期糖基化终末产物糖基化/藕抛5荚缙诩纯袒结果表明:通过/揪蹲5忌镄藕诺模桓咛呛虯梢鹣赴泌的发生糖基化,糖基化的异常高度激活了/藕磐罚胞增殖受抑;外源性应用可能与糖基化的赫芴澹识燃せ/藕磐罚5颊5纳镄藕牛俳虮泶铩五、外源性应用对大鼠创面愈合/藕抛5嫉牡骺通过免疫荧光、∽铡狿等手段研究创面信号转导通路的变化。结果显示:正常大鼠烫伤后,/泄媛傻丶せ睿谏撕天和天纬现表达高峰,与的双峰型相对应。/泶镉隢相一致,表明它是通过信号网络转导调控蚦—氖适北泶铩笫筇躺撕驟无序异常高度激活,蚦表达紊乱,导致创面难愈。外源性与糖基化的竞争受体,抑制大鼠创面/斐<せ睿偈筩—蚦—有规律表达,诱导机体细胞启动有序增殖、分化、迁移信号程序,完成创面愈合。总之,糖尿病创面不易愈合,难愈的机制与机体释放能力不足和大量糖基化而导致基因变异有关,糖基化引起/诖疵嬗瞎讨无序异常激活,不能有效的促使猰和猨表达,外源性的与糖基化竞争受体,调控