第十一章 紫外可见分光光度法2.ppt

第三节基本原理
一、Lamber-Beer定律
二、吸光系数和吸收光谱
三、偏离Beer定律的因素
四、透光率的测量误差
一、Lamber-Beer定律:吸收光谱法基本定律
描述物质对单色光吸收强弱与液层厚度和待测物浓度的关系
假设一束平行单色光通过一个吸光物体
续前
取物体中一极薄层
续前
讨论:
-Beer定律的适用条件(前提)
入射光为单色光
溶液是稀溶液
、液体和气体样品
,各组分吸光度具有加和性
应用:多组分测定
二、吸光系数和吸收光谱
:
单位浓度、单位厚度的吸光度
讨论:
1)E=f(组分性质,温度,溶剂,λ)
当组分性质、温度和溶剂一定,E=f(λ)
2)不同物质在同一波长下E可能不同(选择性吸收)
同一物质在不同波长下E一定不同
3)E↑,物质对光吸收能力↑, 定量测定灵敏度↑
→定性、定量依据
续前
:
1)摩尔吸光系数ε:
在一定λ下,C=1mol/L,L=1cm时的吸光度
2)百分含量吸光系数/ 比吸光系数:
在一定λ下,C=1g/100ml,L=1cm时的吸光度
3)两者关系
(吸收曲线):λ~A
最大吸收
最小吸收特征值→定性依据
肩峰
末端吸收
续前
:
1)测量波长的选择:
2)吸光度读数范围的选择:
3)参比溶液(空白溶液)的选择:
选A=~
注:采用空白对比消除因溶剂和容器的吸收、光的散射和
界面反射等因素对透光率的干扰
三、偏离Beer定律的因素
依据Beer定律,A与C关系应为
经过原点的直线
偏离Beer定律的主要因素表现为
以下两个方面
(一)光学因素
(二)化学因素
(一)光学因素
:
Beer定律应用的重要前提——入射光为单色光
照射物质的光经单色器分光后
并非真正单色光
其波长宽度由入射狭缝的宽度
和棱镜或光栅的分辨率决定
为了保证透过光对检测器的响
应,必须保证一定的狭缝宽度
这就使分离出来的光具一定的
谱带宽度
续前