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第10章紫外-可见分光光度法
及分子荧光分析法
紫外-可见吸收光谱
朗伯-比尔定律
紫外-可见分光光度计
紫外-可见分光光度法的灵敏度与准确度
分析条件的选择
紫外-可见分光光度法的应用
分子荧光分析法简介
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化学分析与仪器分析方法比较
化学分析:常量组分(>1%), Er : % ~ %
准确度高依据化学反应, 使用玻璃仪器
仪器分析:微量组分(<1%), Er : 1%~5%
灵敏度高依据物理或物理化学性质, 需要特殊的仪器
例: %的样品, g, 则m(Fe)≈ mg
重量法 m(Fe2O3)≈ mg, 称不准
容量法 V(K2Cr2O7)≈ mL, 测不准
%~%, 满足要求 2
仪器分析方法分类
1. 光学分析法: 基于电磁辐射与物质的相互作用.
非光谱法(折射法,浊度法,旋光法)
光(不以光的波长为特征讯号)
学
分子光谱法: UV-Vis, IR, MFS, MPS
分光谱法
析原子光谱法: AAS, AES, AFS
法
(以光的吸收、发射等作用而建立的分析方法,通过
检测光谱的波长和强度来进行定性和定量的方法)
: 依据物质的电化学性质及其变化
: 气相色谱, 液相色谱
、热分析法、放射化学法等 3
分子光谱学
¾ 紫外-可见分光光度法(UV-Vis)
Ultra Violet-Visible Spectrophotometry
¾ 红外吸收光谱法(IR)
Infrared Spectroscopy
¾ 分子荧光光谱法(MFS)
Molecular Fluorescence Spectroscopy
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¾分子磷光光谱法(MPS)
Molecular Phosphorescence Spectroscopy
¾光声光谱法(PAS)
Photo Acoustic Spectroscopy
¾拉曼光谱法(RS)
Raman Spectroscopy
¾核磁共振波谱法(NMR)
Nuclear ic Resonance Spectroscopy
¾质谱法(MS)
Mass Spectroscopy
发展联用技术是趋势!
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紫外-可见吸收光谱
吸光光度法是基于被测物质的分子对光具有
选择性吸收的特性而建立起来的分析方法.
特点
–灵敏度高:测定下限可达10-5~10-6 mol·L-1,
10-4 %~10-5 %
–准确度能够满足微量组分的测定要求:
相对误差2 %~5 %(1 %~2%)
–操作简便快速
–应用广泛 6
I0 It
测量光强
度的减弱
分光光度法
的应用:定
量测定与定
性分析
光强的减弱与物
质浓度的关系?
—朗伯-比尔定律光强的测量
物质对光有选择性吸收—分光光度计
—准备知识
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分子吸收光谱的产生
光的基本性质电磁波的波粒二象性
波动性 c
光的传播速度: V ==λ⋅ν
n
c-真空中光速 ×108 m/s
~ ×108 m/s
λ-波长,单位:m,cm,mm,µm,nm,Å
1 µm=10-6 m, 1 nm=10-9 m, 1Å=10-10 m
ν-频率,单位:赫兹(周)Hz 次/秒
n-折射率,真空中为1
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电场向量
Y
量
向
场
磁
X x
Z
传播方向
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微粒性
光量子,具有能量. E = h⋅ν
h-普朗克(Planck)常数 ×10-34 J·s
ν-频率
E-光量子具有的能量
单位:J(焦耳),eV(电子伏特)
1 eV = ×10-19 J
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