β-catenin基因转染毛囊干细胞实验研究.pdf

蜃H久�腋上赴�氖笛檠芯�方勇胡孝辉杨鹏高研究结果研究结论�瓽��对创面愈合影响的细胞分子学的机理研究�瓽��凝胶在糖尿病患者烧伤创面的应用�瓽��基因缺失小鼠创面愈合明显延迟,用���ê兔庖咦橹��Хǘ��觳獯疵嬗�瞎�程中细胞因子和炎症细胞的变化,发现一些细胞因子�鏘��,���和����脱字⑾赴���途�噬细胞�脑缙诮�蟮拿飨韵陆怠4疵娼涸�暮�亢脱9芑�潭染�灾�档汀���悄虿⌒∈蠼弦吧�∈蟠疵嬗�厦飨匝映伲�橛性缙谘字⑾赴��罅亢凸δ艿南陆担�⒎⑾����谋浠�魇朴胙字⑾赴�嗤�L崾綠��可能是创面局部炎症细胞量和功能调控的重要物质。��庥肎��具有明显促进刨面愈合的作用,尤其对糖尿病小鼠创面。���庥每梢圆糠帜�转创面局部的炎症反应。��逋庋芯拷�徊街な担珿��具有趋化炎症细胞的作用,并对刨面修复细胞成纤维细胞具有促进其增殖和胶原蛋白表达的作用。��褂肎��凝胶具有明显促进烧伤患者创面愈合的作用,尤其是对伴有糖尿病的烧伤创面�瓽��是创面愈合重要的细胞因子,���赡芡ü�骰�字⑾赴�⒋俳�薷聪赴�鲋澈凸�能从而加快创面愈合�瓽��对伴有糖尿病的创面修复具有更大的优势上海交通大学医学院附属第三人民医院烧伤整形科,上海���严重皮肤缺损如严重大面积烧伤创面的修复仍是目前临床工作的重点和难点。毛囊干细胞因其具有高增殖和多向分化的潜能备受创伤修复及组织工程领域学者的关注。近年来,关于毛囊干细胞的研究取得了一定的进展。但是,迄今为止距离将其作为大量提供给组织工程化皮肤的来源、或常规的用于临床治疗的来源仍有很大的困难,其主要原因是对毛囊干细胞的认识仍不够完善,尤其是对如何调控和诱导毛囊干细胞增殖和分化的机制尚不明确,缺乏有效地培养及诱导毛囊于细胞增殖的措施及手段。因此,探讨调控毛囊干细胞增殖的信号途径及分子机制,找寻一种促进毛囊干细胞体外大量增殖的有效途径,无疑将为进一步诱导其定向分化并最终推动创伤修复及组织工程化皮肤研究的发展具有重要的理论意义。许多研究证明,��痯����信号通路是一条控制细胞命运及组织器官形态发生的重要通路。�����谴诵藕磐�分械骺馗上赴�鲋撤只�墓丶�肿印D壳肮赜������匀嗣�腋上赴�鲋秤跋�的研究国内外鲜有报道,如果能够通过干预毛囊于细胞内����的表达促进其增殖,无疑将为构建组织工程皮肤提供充足的种子细胞。本研究通过构建������《驹靥澹���H久�腋上赴��鄄炱�对毛囊干细胞增殖的影响,以期为进一步诱导毛囊干细胞定向分化和构建组织工程皮肤奠定重要理论基础。��
实验方法研究结果结论本研究通过中性蛋白酶一胰蛋白酶消化法分离人毛囊干细胞,结合低钙角质细胞无血清培养基培养;通过免疫荧光染色法检测�����、�����、��表达情况以鉴定人毛囊干细胞并观察随培养时间延长其表面标志物变化;倒置显微镜下观察细胞贴壁、增殖的形态学特征;选用��ê吐薜っ鰾��酸尼罗蓝染色法分别检测人毛囊干细胞的增殖特性及克隆形成能力;用�肴樘擒彰溉旧ǚḿ觳馊嗣��干细胞衰老程度。自行构建�����狤��诤匣�蚵�《荆�设立阴性对照组、空病毒对照组和病毒组,将�����慢病毒感染毛囊干细胞;��ḿ觳飧腥厩�后毛囊干细胞的增殖活性;罗丹明�土蛩崮崧蘩度旧ǚḿ觳飧腥厩昂竺�腋上赴�寺⌒纬赡芰Γ幻庖�荧光染色法检测感染后毛囊干细胞�—����表达情况