免疫学检测技术的应用
感染性疾病、自身免疫病、肿瘤、免疫缺陷病、超敏反应性疾病等。
疾病预后、转归等监测
细胞免疫功能,体液免疫功能,非特异性免疫功能测定等。
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第一节抗原或抗体的体外检测
根据抗原与抗体特异性结合反应的特性,用肉眼观察或借助仪器检测抗原抗体反应的结果,由此对样品中的抗原或抗体进行定性、定量或定位分析。
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一、抗原抗体反应的特点
抗体可变区与相应抗原表位的空间构型互补,高度特异性地结合。
抗原抗体以非共价键结合,易受温度、pH和离子强度的影响而解离。
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抗原抗体反应的特点
抗原略多于抗体的比例,可形成肉眼可见的复合物。
非共价结合阶段——反应迅速
IC形成大复合物——反应较慢
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二、影响抗原抗体反应的因素
比例适当才能形成可见的反应复合物
% NaCL溶液
最适温度37度
最适PH 6~8
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三、抗原抗体反应类型
(一)凝集反应
概念:颗粒性抗原(细菌、红细胞等)与相应抗体结合,在一定条件下出现肉眼可见的凝集物,称为凝集反应。
抗原与抗体直接混合作用,出现凝集为阳性结果。
①玻片直接凝集法:定性试验
②试管直接凝集法:半定量试验
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试管法半定量试验
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玻片直接凝集试验
1/2
1/4
1/8
1/16
1/32
1/64
1/128
1/256
1/512
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先将可溶性抗原或抗体吸附在颗粒载体上(如RBC, 乳胶颗粒),再与相应抗体或抗原反应,出现凝集为阳性结果。
临床常用的有间接血凝试验、乳胶凝集试验等。
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待检样品
抗原吸附血球或乳胶颗粒
反应凝集物
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先将待检抗原与已知的抗体反应,再加入用已知抗原吸附的载体颗粒,不出现凝集为阳性结果。
例:乳胶凝集抑制试验检测HCG (妊娠诊断)
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步骤1:将已知抗HCG抗体与待检标本混匀
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步骤2:加入HCG吸附的乳胶颗粒混匀
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HCG吸附乳胶颗粒
结果判断:
不凝集为阳性结果
已知抗体
待检标本
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凝集反应
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