食用油脂中辣椒素的测定.doc

附件
食用油脂中辣椒素的测定
BJS 201801
范围
本方法规定了食用油脂中辣椒素(天然辣椒素、合成辣椒素、二氢辣椒素)含量的液相色谱-串联质谱测定方法。
本方法适用于食用油脂中辣椒素(天然辣椒素、合成辣椒素、二氢辣椒素)含量的测定。
原理
试样经二***甲烷溶解,氢氧化钠水溶液提取酸化后,过固相萃取柱净化,采用液相色谱-串联质谱仪检测,外标法定量。
试剂和材料
除另行规定外,水为GB/T 6682规定的一级水。
试剂
乙***():色谱纯。
甲醇(CH3OH):色谱纯。
甲酸(CH2O2):质谱级。
二***甲烷(CH2Cl2):色谱纯。
氢氧化钠(NaOH):分析纯。
浓硫酸(H2SO4):98%,分析纯。
溶液配制
%甲酸水溶液:取甲酸()1 mL用水定容至1000 mL,用滤膜( µm,水相)过滤后备用。
%甲酸乙***溶液:取甲酸()1 mL用乙***()定容至1000 mL,用滤膜( µm,有机相)过滤后备用。
2%氢氧化钠溶液:称取20 g 氢氧化钠()溶于1000 mL水中,摇匀备用。
稀硫酸(1+15)溶液:取10 mL浓硫酸()缓缓倒入150 mL水中,搅拌均匀备用。
标准品
天然辣椒素、合成辣椒素、二氢辣椒素标准品的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、,纯度≥98%。
标准溶液配制
标准储备液:分别称取天然辣椒素、合成辣椒素、二氢辣椒素标准品() g( 1 g),用甲醇()溶解,并转移至100 mL容量瓶中,定容至刻度,标准储备液浓度为1 mg/mL。贮存于4 ℃冰箱中,有效期3个月。
混合标准系列工作液:分别准确吸取标准储备液()适量于容量瓶中,用甲醇() ng/mL、 ng/mL、 ng/mL、1 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL、50 ng/mL和100 ng/mL的标准系列混合工作液。临用时配制。
C18 固相萃取(SPE)小柱:1000 mg,6 mL,或等效SPE柱。
仪器和设备
高效液相色谱-串联质谱仪(LC-MS/MS):配有电喷雾离子源。
超声波清洗器。
分析天平: 1 g。
离心机:转速≥4000 r/min。
涡旋混合器。
分析步骤
试样制备
准确称取1 g( 1 g)样品于10 mL具塞塑料试管中,加入1 mL二***甲烷(),再加入3 mL 2%氢氧化钠溶液(),涡旋提取10 min,4000 r/min离心10 min,取上层水相;残留有机相再用3 mL 2%氢氧化钠溶液重复提取一次,合并水相,再用稀硫酸溶液()调节pH至2-3之间后进行固相萃取操作。C18 SPE小柱预先用3 mL乙***淋洗3次,再用3 mL纯水淋洗2次进行活化,然后将调节完pH值