HEK293T细胞培养ppt演示课件.ppt

细胞培养技术
蔺帅
2013年4月
1
.
主要内容
细胞简介
1
细胞培养技术平台
2
HEK293T细胞的培养具体方法与步骤
3
细胞培养的常见问题与解决方案
4
细胞间的操作注意事项
5
2
.
细胞简介
细胞是生命活动的基本单位
1665年英国学者Robert Hooke,用自制的显微镜观察软木的薄片,第一次发现植物的细胞结构,并首次借用拉丁文Cella(小室)词.
3
.
细胞简介
细胞是生命活动的基本单位
1983-39德国植物学家施莱登和动物学家施旺确立了“细胞学说”的基本原则
1、细胞是有机体,动植物都是由细胞发育来的
2、每个细胞都作为一个相对的独立单位,有自己的“生命”
3、新的细胞可以通过老的细胞繁殖产生
4
.
细胞培养技术平台
药物筛选
基因诊疗
治病机理
组织工程
基因诊断
试管婴儿
培养细胞
能做什么
5
.
细胞的培养具体方法与步骤
细胞培养细胞培养(cell culture) 的含义,简单地说即是把来自机体的组织经分散成为单个细胞,放在类似于体内的体外环境中生存,使其不断生长、繁殖或传代,借以观察细胞的生长、繁殖、衰老等生命现象。细胞培养技术在遗传学、免疫学、肿瘤学、病毒学、分子生物学等领域已得到广泛的应用
原代培养
传代培养
6
.
细胞的培养具体方法与步骤
原代培养
用直接从机体获得的细胞进行的培养称为原代培养。这种培养过程主要是采用无菌操作的方法,把组织(或器官)从动物体内取出,经酶消化处理,使分散成单个细胞,然后在人工条件下培养,使其不断地生长和繁殖。原代培养是建立各种细胞系的第一步。
7
.
细胞的培养具体方法与步骤
传代培养
传代培养是指细胞从一个培养瓶以1:2或其他比率转移,接种到另一培养瓶的培养。贴壁培养细胞的传代通常是采用胰蛋白酶消化,把细胞分散成单细胞再传代,而悬浮型生长细胞则用直接传代法或离心法传代。
8
.
HEK293T和HEK293细胞
HEK293细胞简介
HEK293细胞在倒置显微镜下的形态
9
.
HEK293T和HEK293细胞
HEK293细胞简介
HEK293细胞株是转染腺病毒E1A基因的人胚肾上皮细胞,由于容易转染且容易培养,常被用于转染试验。
HEK293T
HEK293
SV40大T抗原
瞬时转染
稳定转染
转染效率更高
10
.