低剂量电离辐射对细胞的影响-生物医学工程专业毕业论文.docx

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中文摘要
目的及意义:
通过分析细胞受两种低剂量X射线辐射照射后CHO细胞和293T两种细胞的增殖数据、细胞形态以及细胞通透性改变情况,系统性地研究低剂量电离辐射对细胞的影响,探讨低剂量电离辐射对细胞的作用。
研究方法:
1、分别采用了 KV 和 MV 级两种 X 射线产生仪器,用 KV 级 B 组(1cGy、2cGy、3cGy、
4cGy)和 MV 级 A 组(25cGy、50cGy、100cGy、150cGy)共 8 个剂量组分别对 CHO 细胞和 293T 细胞进行照射,并使用荧光显微镜及 BD 流式细胞仪等仪器观察细胞受照后不同时间段(0h,4 h,8 h,12 h,24 h,48 h)的 CHO 细胞和 293T 细胞, K-8 方法分析其细胞增殖活力; 2、观察对照经过上述 8 组辐射照射的两种细胞的 PEI 介导 GFP 质粒转染效率, 并与对照组作对照,通过分析细胞 GFP 的转染效率在辐射前后发生的变化分析细胞通透性的改变状况,研究低剂量电离辐射促进细胞壁通透性变化情况。
结果:
1、CHO 与 293T 两种细胞在两种 X 射线辐射照射后的细胞形态基本没有变化。在经过 24h 至 48h 细胞已增殖数代后,也没有发现形态改变。没有发现细胞在各组辐射照射后发生形态变异现象,细胞均能正常生长增殖。且细胞的荧光图像所显示的细胞密度与细胞生存率曲线对应,当细胞生存率出现高峰时,细胞密度增大。 2、两种细胞均在照射后大约8小时位置出现了细胞增殖峰值,随后在24h的位置, 细胞的生存率有所下降,但到48小时时又会回升到高于对照组的生存率水平。 CHO细胞的增殖高峰会早于293T细胞,可能就是由于细胞周期的不同而引起增殖高峰时间的差异。
3、6MV 机器照射后,可使 CHO 细胞出现生存率升高的趋势。其中以 25cGy 剂量组照射的增殖快而多。大于 25cGy 的受照剂量组,其增殖速度减慢,但仍然高于对照组。而对于 293T 细胞,仍然是 MV 组 25cGy 剂量对细胞增殖率提高效果最好。
I
4、120KV 机器剂量在 1cGy-4cGy 的电离辐射引起的细胞转染效率变化较小,且
除第三次实验外两组细胞 KV 组转染效率都低于 MV 组细胞的转染效率。两种细胞最高的转染效率均出现在 MV 机器照射 A1 25cGy 剂量组。且对两种细胞引起的转染效率升高率相似。293T 细胞相比对照组相比转染效率升高了 %,CHO 细胞相比对照组相比转染效率升高了 %,随着剂量的增加,转染效率反而降低但仍然比对照组高。
结论: 1、与文献报道的高剂量电离辐射引起细胞形态畸变不同,和对照组未经电离辐射处理的细胞组相比,低剂量电离辐射不会导致 293T 和 CHO 细胞的形态畸变,
低剂量电离辐射组细胞形态与空白对照组细胞形态相似,细胞在增殖过程中形态和生长行为正常。
2、与高剂量电离辐射不同,低剂量电离辐射不会引起 293T 细胞和 CHO 细胞的凋亡,反而出现了刺激兴奋效应,促进了细胞的生长增殖。
3、MV 与 KV 两种低剂量 X 射线辐射对 293T 细胞和 CHO 细胞的生长刺激促进作用呈现剂量相关性,MV 级的 25 cGy 剂量组辐射均可引起两种细胞生长增殖提高,其它 MV 组因剂量较大,效果反而下降。KV 组对 293T 细胞生长的促进作用随剂量增加而增加,而对 CHO 细胞则没有产生有统计意义的差别作用。 4、低剂量 X 射线电离辐射刺激改善细胞的通透性,使 PEI 介导的 GFP 转染率提高,且 25cGy 剂量组的细胞转染效率最高,对 293T 细胞和 CHO 细胞的转染率可分别提高 与