电化学分析法在生化分析中的研究及应用-海洋化学专业毕业论文.docx

电化学分析法在生化分析中的研究及应用电化学分析法在生化分析中的研究及应用摘 要(生化分析在生命科学、临床检测、食品分析等方面有着极其重要的作用,将电化学分析应用于生化分析领域测定各种生物物质的研究具有非常实际的意义。电化学分析具有灵敏度高、选择性好、仪器简单等优点,且不易受生物样品中溶血、黄疸等现象的干扰,特别适合低浓度或少量样品的分析。将电化学分析法同生化分析相结合的生物电分析化学近年来成为研究的热点。本论文的研究工作得到了国家自然科学基金“伏安酶联免疫分析酶催化反应及植物病毒伏安酶联免疫试剂盒的研究,”,“伏安酶联免疫体系的光谱电化学研究,”和青岛市科委项目“植物病毒TMV、TRSV和SBMV伏安酶联免疫检测试剂盒的扩1大试制,2000一GS一2一02”资助。文,本论文将电化学分析法同免疫分析、酶法分析、蛋白质分析等生化分析中常见的分析内容相结合,以伏安法或极谱法作为主要测定手段,建立了测定碱性磷酸酯酶、辣根过氧化物酶和蛋白质的电化学分析法,并成功应用于以辣根过氧化物酶为标记酶的酶联免疫分析法测定多种重要植物病毒的研究和人血清样品中碱性磷酸酯酶、蛋白质含量测定的研究,取得了较好的结果。所取得的创新性研究成果是:1)分别建立了以对硝基磷酸苯酯、磷酸苯酯、2一抗坏血酸磷酸酯为底物示差脉冲伏安法测定碱性磷酸酯酶的分析新方法,并应用于人血清样品中碱性磷酸酯酶含量的测定,测定结果同光度法测定相吻合。2)分别建立了以对苯二***、邻苯二***、对氨基苯酚、邻氨基苯酚和3,3’,5,5'-四***联苯***为底物的伏安酶联免疫分析体系并应用于植物病毒的测定,,所得结果同光度法相比较,灵敏度能够提高一个数量级以上。电化学分析法在生化分析中的研究及应用3)提出了以酸性铬蓝K为辣根过氧化物酶(HRP)电化学底物的新体系,酸性铬蓝K本身具有电化学活性,HRP催化H:0:氧化其发生分解反应,其峰电流的降低同HRP的加入量在20~2000U/L之间呈线性关系,应用于HRP标记物的测定,取得了较好的结果。4)首次开展了烟草花叶病毒伏安酶联免疫检测试剂盒的研制,成功开发了烟草花叶病毒的伏安酶联免疫检测试剂盒。5)建立了以茜索红S和铍试剂III为电化学探针测定蛋白质的新方法。\茜素红s和铍试剂III本身具有良好的电化学性质,蛋白质加入后与之发生结合反应,生成一种非电活性的复合物,导致其在溶液中的浓度降低,相应在***电极上的电化学还原信号降低,降低量同蛋白质的浓度在一定范围内成正比。其中以茜素红s为电化学探针,,应用于实际人血清样品的测定,结果同经典的光度法一致。、lr关键词:电化学分析;碱性磷酸酯酶;辣根过氧化物酶;蛋白质,酶联免疫分析;人血清样品皇垡兰坌塑堡垄生些坌塑!塑竺窒垦窒星——Studies and AppIication of EIectroanaIyticaIMethodS to BiochemicaI AssayAbStractBiochemicalassayisveryimportantin1ifescience,clinicaldiagnosiS,—analyticalmethodisveryseasitive,(。)andScienee&TechnicalFoundationofQingdaoCity(—02).InthiSthesiS,binedwithenzymatiCassay,immunoassayandproteinassaytoestablishanewdetectionmethodforalkalinephosphatase,—。labeledenzyme。—1inkedimmunoassayforsomeimportantplantvirusesandtothedeterminat