检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质.ppt

实验检测生物组织中的糖类、
脂肪和蛋白质
:
某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。如:
①.还原糖的鉴定:
还原糖+
还原糖:
②.脂肪的鉴定:
脂肪+
脂肪+
③.蛋白质的鉴定:
蛋白质+
④淀粉+
斐林试剂
砖红色沉淀
苏丹Ⅲ染液
橘黄色
苏丹Ⅳ染液
红色
双缩脲试剂
紫色
碘
蓝色
葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麦芽糖
斐林试剂与双缩脲试剂的比较:
A液:
B液:
甲液:
乙液:
紫色物质生成
砖红色沉淀
先加A液,再加B液,不需加热
甲液与乙液先混再用,且现配现用,需加热
蛋白质
还原性糖
试剂组成
检验结果
试剂用法
检测对象
双缩脲试剂
斐林试剂
比较项目
斐林试剂
双缩脲试剂
不
同
点
使用
方法
反应
条件
反应
原理
不
同
点
颜色
浓度
相同点
甲液和乙液混合均匀后方可使用,且现配现用
使用时先加A液,再加B液
需水浴加热
不需加热
还原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化,Cu(OH)2被还原为Cu2O
具有两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应生成络合物
砖红色
紫色
乙液CuSO4溶液浓度
g/mL
B液CuSO4溶液浓度
g/mL
都含有NaOH、CuSO4两种成分, g/mL
C
2.(2013·信阳模拟)收集健康人的4种液体,分别用斐林试剂鉴定。鉴定方法、液体和现象相匹配的一组是( )
、尿液、不变色
、血清、砖红色沉淀
、唾液、不变色
、胃液、蓝色
B
1.
:
尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
1、还原糖的检测和观察:


。
糖
白色或近于白色
制备组织样液:
制浆过滤取液
:
用一层纱布
的植物组织,
可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀,说明植物组织样液中含有还原糖。
注入2mL苹果组织样液
注入1mL刚配制好的斐林试剂
水浴加热约2min
呈色反应
变成砖红色
50----650C的温水
结论:
甲乙液等量混匀现配现用
振荡、混合摇匀呈现蓝色
①还原糖有。
②试剂: . (甲液:
的, 乙液:.)
甲乙液必须后再加入样液中, 。
③必须。
葡萄糖,果糖,麦芽糖
用水浴加热
斐林试剂
NaOH
CuSO4
等量混合均匀
现配现用
注意事项:
④颜色变化:
浅蓝色
棕色
砖红色
、过滤,得到提取液,并按下表步骤操作:
经上述处理后,各试管分别加入斐林试剂1 mL,并置于50℃~65℃水浴中2 min,试管中液体呈砖红色且颜色由浅到深依次
是( )
、乙、丙 、甲、乙 、乙 、甲
①
②
③
④
加入淀粉液
加入提取液
水浴温度
水浴时间
甲
2 mL
2 mL
20℃
30 min
乙
2 mL
2 mL
40℃
30 min
丙
2 mL
2 mL
100℃
30 min
C
2、脂肪的检测和观察:
圆形小颗粒呈橘黄色,说明有脂肪存在。
方法一:待测组织样液+苏丹Ⅲ染液→橘黄色
取材:
花生种子(浸泡3~4h),将子叶削成薄片
方法二:制作子叶临时切片,用显微镜观察
子叶细胞的着色情况。
制片
①取最理想的薄片
②在薄片上滴苏丹Ⅲ染液(2~3min)
③去浮色(用50﹪酒精)
④制成临时装片
观察
低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒,
然后用高倍镜观察
结论: