益元宁肝胶囊质量标准研究.docx

益元宁肝胶囊质量标准研究
【摘要】目的:建立益元宁肝胶囊的质量控制方法。方法:采用TLC法鉴别方中的山茱萸和丹参,采用HPLC法测定马钱苷的含量。结果:在TLC色谱中可检出山茱萸、丹参的特征斑点;马钱苷在~μg ,平均回收率为%。结论:所建立的方法能够准确可靠地进行定性、定量检测,重复性好,适用于益元宁肝胶囊的质量控制。
【关键词】益元宁肝胶囊;马钱苷;山茱萸;高效液相色谱法
益元宁肝胶囊为濮阳市某医院协定处方,由菟丝子、山茱萸、黄芪、灵芝、丹参、肉苁蓉、贯众等药组成,具有解毒护肝、益气健脾、调节免疫的功效,用于急慢性肝炎、肝炎病毒携带者。本品临床疗效肯定,但原质量标准较简单,不能准确地把握产品内在质量。本实验采用薄层色谱法对方中的山茱萸和丹参进行了薄层鉴别,采用高效液相色谱法测定山茱萸中的马钱苷的含量[1],建立了简便可行、准确可靠的质量控制标准和检验方法。
1 仪器与试药
Agilent 1260高效液相色谱仪,配有四元梯度泵和Agilent chenstation数据工作站;artorius CPA 225D分析天平,编号:26190055。熊果酸对照品,丹参***ⅡA对照品,马钱苷,均购自中国药品生物制品检定所。益元宁肝胶囊及阴性对照品自制均由濮阳市某医疗机构提供;乙***为色谱纯,水为娃哈哈纯净水,其他试剂为分析纯。
2 方法与结果
薄层鉴别
山茱萸的薄层鉴别取本品内容物5g,倾取内容物,置索氏提取器中,加***适量,加热回流2h,提取液回收***至干,残渣加无水乙醇-***仿混合液1ml微热使溶解,作为供试品溶液。另取熊果酸对照品,加无水乙醇制成每毫升含的对照品溶液。按照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以环己烷-***仿-乙酸乙酯为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色荧光斑点。阴性对照无相应斑点。
丹参的薄层鉴别取本品内容物5g,倾取内容物,加***仿50ml,加热回流1h,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇2ml使溶解,作为供试品溶液。另取丹参***ⅡA对照品,加乙醇制成每毫升含1mg的溶液,作为对照品溶液。按照薄层色谱法试验,吸取上述供试品溶液10μl、对照品溶液5ul,分别点于同一硅胶G薄层板上,以苯-醋酸乙酯为展开剂,展开,取出,晾干。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色荧光斑点;阴性对照无相应斑点。
图1 山茱萸薄层鉴别图2 丹参薄层鉴别
马钱苷的含量测定[2]
色谱条件色谱柱: Venusil MP C18柱;流动相:乙***一―水为流动相;流速为/min。柱温30℃,检测波长为238,理论塔板数大于 3000。在此条件下,马钱苷与相邻组分均能达到完全分离。
对照品溶液的制备分别精密称取马钱苷对照品,加80%甲醇制成浓度为/ml的溶液,作为对照品储备溶液,备用。取上述对照品储备溶液2ml至10ml量瓶中,加80%甲醇至刻度。即得每毫升含马钱苷的对照品溶液[3]。
供试品溶液的制备取本品内容物研细,取约,精密称定,置烧瓶中,精密加入80%甲醇25ml,称定重量,加热回流1h,放冷,用80%甲醇补足减失的重量,滤过,取续滤液,作为供试品溶液。阴性对照品溶液的制备:另取