枸杞多糖对糖尿病大鼠血—视网膜屏障的保护作用与rock通路表达机理及研究.pdf

摘要材料与方法:,随机分为椋篊组:正结果:目的:明确枸杞多糖蕴悄虿〈笫笱R皇油て琳系谋;ぷ饔茫/尾静脉注入,分别检测视网膜中朗含步探讨枸杞多糖通过调控信号通路及其底物谋泶铮跎傺R皇油屏障渗漏的作用机制。常对照组;组:炷#籐组:炷3赡:笥枰訪/·灌胃,组予以等量的生理盐水灌胃。分别于、、槿【猜鲅#⑷⊙球。观察大鼠的一般情况;记录各时间点各组大鼠体重变化、血糖值及甘油三酯和胆固醇的浓度;伊文思蓝量。,分组及给药方法取材时间同实验一,采用染色光镜观察各组大鼠视网膜各层组织细胞数量及形态变化。血管铺片形态学观察:视网膜动静脉的形态、管径,同时采取免疫组化方法,检测视网膜血管网的表达及狄度值半定量分析,采用透射电镜技术观察视网膜毛细血管内皮细胞、周细胞及感光细胞超微结构。,随机分为椋珻组、组、楦┓椒ㄈ〔氖奔渫笛橐唬現组:成模后法舒地尔骨蛔⑸/琇组:成模后辔腹腔注射,各组于取材。分别用免疫组织化学方法检测、泶情况进行半定量分析。免疫印迹方法检测、及其底物鞍妆达的量,并利用凝胶成像系统对其进行定量分析。/,培养基继续培养凑::写ù7肿榧觳猓汗卜组,正常对照组:含葡萄糖/桓咛组:含葡萄糖/桓咛组:含葡萄糖/籐咛组:含葡萄糖//:高糖椋含葡萄糖//:于、、、进行指标检测。倒置显微镜下观察细胞形态的变化;以辣根过氧化酶魇咀偌劣枚颐稚⑾低臣觳/单层通透性,免疫荧光法观察细胞骨架的变化、检测和牡鞍妆泶锪浚⒔邪攵糠治觥甃对大鼠血糖、血脂及血一视网膜屏障渗漏的影响:辽宁中医药大学届博士学位论文
列明显紊乱;毛细血管明显扩张,数量增加。椤组各层组织形态与L潜浠篖干预后的各组大鼠对应同时期的大鼠的血糖均有明显下降,时血糖下降幅度为%,时下降幅度为%,L窍陆捣任ィ浣血糖效果以最为明显,随着病情的进展慕堤切Ч兴跞酰陆德驶稳定在%~%之间。逯氐谋浠篋槌赡:螅J汲鱿窒荩逯叵陆祷蛟黾踊郝飨缘陀相同时间段的其他两组大鼠的体重。而樵蛱逯赜胝6哉兆楸冉下杂邢陆担明显好于组。V谋浠篋时甘油三酯基本达到正常值的叮鳯组甘油三酯的浓度有轻度上升。盌樽艿üü檀寂ǘ扔胝W榛疚薏钜焐貽.。谘R皇油て琳仙┑谋浠篋榇笫驟┝直增加了倍、倍、倍。而枸杞多糖组较糖尿病组以上三个时间点渗透量降低了%、%、%,组间比较仄G;ぷ饔帽硐志偷淖蠲飨浴甃对大鼠血一视网膜屏障形态学变化的影响:旧ü饩倒鄄欤组神经纤维层断裂明显;节细胞、内颗粒层细胞排正常组织基本无明显差别,组仅出现内、外颗粒层排列稍有不规则,毛细血管的轻度扩张。油ぱ9芷唐组毛细血管网迂曲,扭结,某些部位出现节段性膨大,管腔狭窄甚至闭塞。周细胞和内皮细胞有所减少;、、閂灰度值.、.、.。组间有明显差异仄组并随着病程的进展,表达的量不断增高。缇迪鲁⒔峁沟母谋洌组大鼠视网膜基底膜进一步增厚,血管内皮细胞及周细胞肿胀,胞质内线粒体肿胀变性,管腔可出现扩张。视杆细胞膜盘模糊,出现溶解、断裂,间隙进一步扩大。誓诓糠窒吡L迩岫戎渍捅性,基底膜增厚不明显,毛细血管壁完整,管腔无扩张。视杆细胞,膜盘结构略有些模糊,结构开始出现紊乱,但纹理尚清。坭蕉嗵嵌蕴悄虿〈笫笱R皇油て琳媳;ぷ饔没淼难芯浚庖咦榛ḿ觳獾腛泶铮褐饕7植荚谑油つ谖宀闵稀;叶戎枸杞多糖对糖尿病大鼠血一视网膜屏障的保护作用及通路表达的机理研究
长量逐渐上升,组间有明显差异仄鳯组.:.±楸泶锪扛哂谄渌街瘟谱樨.,与橄嘟咏时,.±籇.±籐组.,组表达较正常对照组显著减少。随着糖尿病视网膜病变时间的延长而逐渐下降。各治疗组与组比较,表达量明显增加。樾Ч詈仄,隖组之间无明显差异。庖咦榛ḿ觳獾腞表达:主要分布在神经节细胞层和内颗粒层,灰度值.±籇.±籐组.,组从开始减弱,并随着病程的延长,泶锏牧恐鸾ピ黾樱鳯组表达量并没有明显的增加。各治疗组间比较,橛胝W槲廾飨圆钜少,治疗效果最好,〖7ḿ觳釵鞍妆泶铮篋樗孀挪〕痰难映ぃ琌鞍的量逐渐下降,组间有明显差异仄鳯组.:.±.±琇组与楸冉螸组表达略低,但无明显统计学意义组表达量高于其他两治疗组仄甇隒组相接近。庖哂〖7ḿ觳釸蛋白表达:各组组大鼠蛋白表达随着病程的延长量逐渐上升,组间有明显差异仄欢鳯组.;.±.±琇组与楸冉螸组表达略高,有统计学意义楸泶锪扛哂谄渌街瘟谱樨芆.,与橄嘟咏庖哂〖7ḿ觳釶蛋白表达:各组组大鼠蛋白表达随着病程的延.±琇组与楸冉螸组表达略高,有统计学意义.。坭蕉嗵嵌愿咛桥嘌率油ぱ9芷は赴鸕/信号传导通路的影响:实ゲ惚馄缴掀ぷ矗咛组组内皮细胞收缩明显,有的伸出长长的伪足,边界模糊,细胞间形成明显的裂隙,细胞生长数量明显较对照组少。高糖樵蛴笮翁J汲鱿直浠6鳯咛组、高糖椋鲇时,细胞略有些变圆,细胞数量略少。单层通