抗肺炎链球菌工程多肽体内外抗菌活性研究（可复制论文）.pdf

四川大学
硕士学位论文
抗肺炎链球菌工程多肽体内外抗菌活性研究
姓名:秦燕
申请学位级别:硕士
专业:生理学
指导教师:丘小庆
20060428
声研究生:秦燕、明尸本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得四川大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本学位论文成果是本人在四川大学读书期间在导师指导下取得的,论文成果归四川大学所有,特此声明。指导教师:
抗肺炎链球菌工程多肽体内外抗菌活性研究生理学专业摘要硕士研究生;秦燕丘小庆教授指导教师:肺炎链球菌,窍妇腥拘约膊〉闹要病原菌,它可引起机体局部和全身的多种感染,在世界人群中有较高的发病率和死亡率,患者主要是老人和鲈拢岁的婴幼儿。近年来,随着抗生素的广泛应用,细菌耐药情况日渐严重,肺炎链球菌也不例外,耐青霉素及多重耐药肺炎链球菌在许多国家和地区均有报道,流行病学呈明显的上升趋势,为人类治疗肺炎链球菌感染又提出新的挑战。因此迫切需要发展新型的抗菌素。大肠菌素是大肠杆菌分泌的一种细菌素。现己发现的大肠菌素达种之多。由于它们只能识别同种异株大肠杆菌外膜和内膜上的特异受体,因此大肠菌素只对近缘菌株具有杀伤作用。大肠菌素的作用方式可分为三种:即形成离子通道使膜去极化、降解耙种频鞍字实合成。大肠菌素粲诳尚纬衫胱油ǖ赖腅宕蟪兀年证实其工作机制是在靶细胞膜上形成电压依赖性离子通道,造成细胞内容物泄漏,能量衰竭,,当大四川大学硕宦畚
特殊的状态一感受态,肺炎链球菌的感受态就是由胞外的信息素一感本室利用分子生物学的方法构建出一类多结构域蛋白质分子机器——抗肠菌素的浓度等于甚至小于甀时仍然能实现对细菌的有效攻击。处于同一环境中的细菌并非孤立存在,而是进行着相互问的“通讯”,它们通过自身分泌和感应特定的信号分子来完成信息交流。很早就知道肺炎链球菌具有自然转化的能力,转化的发生需要细菌细胞处于受态刺激因子诱导形成的。感受态刺激因子甋珻且桓鲇霭被岵谢槌傻亩嚯模煞窝琢辞蚓自身生长过程中持续小量地分泌至胞外,为基因的表达终产物。生长中的细菌其操纵子以较低的水平被转录,从而导致培养基中的缓慢累积。达细菌对数生长的早期至中期,分泌至胞外的累积达到阈值浓度·,保丛诮橹手兄鞫已巴攴窝琢辞菌胞膜上的受体,与之结合,并激活细胞内二元调节系统诱导靶细胞感受肽调节子的表达。据此可知肫渌逊⑾的细菌信息素一样具有自主导向的特性。。方法:、离子交换柱纯化后,通过体外抗菌试验和体内感染保护试验检测其抗菌活性。体外实验部分采用液体培养法检测苑窝琢辞蛞、的抗菌活性,并将肓俅渤S玫几种抗生素对肺炎链球菌的抗菌效力进行比较。采用最小杀菌浓度和杀,.四川大学硕士学位论文
腔感染肺炎链球菌⑷,观察小鼠天存活情况,绘制生存曲线图。实验结果;体外实验结果:/逐渐增至时,对肺炎链球菌的抑制作用不断增强,并呈明显的剂量依赖性。与几种常用的抗生素进行比较,按照单位体积内相同药物分子数量进行校正,分别是青霉素及万古霉素抗菌效力的逗丁T谙嗤Χǘ认/,.完全抑制细菌生长达小时,而头孢噻肟钠、苯唑青霉素、红霉素只能抑制细菌小时的生长。杀菌实验结果初步说明且恢侄园邢妇猩鄙俗饔玫墓こ潭嚯模园邢妇墓セ魇致死性的。诠セ靼邢妇北硐殖鼋虾玫奶匾煨浴T谑笛榕ǘ认它对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、临床分离菌株肠球菌、大肠杆菌及阴沟肠杆菌均未表现出抑菌活性。体内实验结果:苑窝琢辞蚓腥拘∈筇迥诳咕钚砸步锨浚对照组小鼠在小时全部死亡的情况下,经尾静脉给予实验组小鼠/的苁剐∈,全部小鼠均存活天,存活率为ァT谙嗤亮肯/对照组和野生型大肠菌素榫∈蹦谌ú克劳觯嗝顾刈樵小时内全部死亡,万古霉素组感染天后仅存活唬婊盥饰ァ硐殖隽顺鍪匝橹兴每咕氐奶迥诟腥颈;ぷ饔茫腥緇后的存活数为唬婊盥蚀锏ァ综上所述:构建的谔逋饧疤迥诙汲氏殖龆苑窝琢辞蚓陌向杀伤活性。按照单位体积内相同药物分子数量进行比较,对肺炎链球菌曲线的方法,观察纳本饔茫惶迥诓糠盅∮肒∈螅四川大学硕士学位论文
菌而占,目咕钚源笤际乔嗝顾氐倍,万古霉素的倍,为治疗肺炎链球菌感染提供了新的思路和发展方向,具有投入临床应用的潜在价值。关键词:.的纯化、体内外抗菌活性、肺炎链球菌四川大学硕士学位论文
—篞:—婴型奎兰竺主兰些堡苎:瓸《,