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粪便标本中病原菌的检测[摘要]由于粪便标本中各种正常菌群含量甚多,仅以染***和形态无法分辨是否为病原菌。因此,粪便标本一般不作直接涂片检查,而是通过分离培养细菌达到检出病原菌的目的。本试验综合运用糖发酵试验,药敏试验,半固体接种法以及玻片凝集反应等方法确定粪便标本中分离出的细菌中是否有致病菌以及该致病菌为何菌种,同时也为其它标本中病原菌的检测提供可借鉴的经验与方法。[关键词]粪便标本分离培养糖发酵试验药敏试验半固体接种法玻片凝集反应正常人粪便中可见较多正常菌群,其菌量和菌谱处于相对稳定状态,保持着细菌与宿主间的生态平衡。但在某些病理情况下,粪便中可出现致病菌。根据临床症状与体征,对粪便标本进细菌学、血清学和生物分子学检验,在确诊病因上极为重要。在生化试验和血清学试验中,不同的菌种可发生特异性的反应,这样就可检出致病菌并根据对多项试验结果的分析达到确定致病菌菌种的目的。糖酵解试验证明待测菌分解葡萄糖,产酸不产气,又不能分解乳糖;血清学反应中,待测菌与诊断痢疾血清发生细菌凝集反应,再结合多种结果分析,最终确定粪便标本中存在致病菌痢疾志贺菌。%酒精稀释石炭酸复红染色架吸水纸接种针小砂轮葡萄糖发酵微量管乳糖发酵微量管诊断血清Muller-Hinton琼脂平板青霉素、链霉素、,把粪便标本菌液接种在伊红美蓝琼脂平板上。然后将培养皿倒置,37℃培养24小时后,观察结果。;用接种针将粪便标本分离菌接种在半固体琼脂培养基中。将以上各培养基管置于37℃培养过夜。观察细菌在各培养基上生长特征。-2滴,经1分钟后用细流水缓慢冲洗,并倾去玻片上余水。-2滴,经1分钟后用细流水缓缓冲洗,并倾去玻片上余水。%酒精数滴,轻轻摇动玻片几秒钟,使均匀脱色,然后斜持玻片,使脱掉的染料随酒精流去,再滴加酒精,直到流下的酒精无色或稍淡紫色为止,立即用细流水交酒精冲洗掉,并倾去玻片上余水。-2滴,经30秒-1分钟后用细流水缓缓冲洗,并倾去玻片上余水。标本凉干后,滴加香柏油,用油镜观察。,用灭菌接种针刮取细菌新鲜培养物少许,分别接种在葡萄糖发酵微量管和乳糖发酵微量管内。将微量管平放在平皿盖内,37℃培养过夜后观察结果。-5个,接种于4-5ml肉汤培养基内,置35℃孵育4-6小时,*108/ml麦氏比浊管浓度。加入来菌盐水,使其浓度与标准管一致。~6ul×2环。平板密集划线接种细菌(纱窗样)。设计三点,三点之间等边三角距离,点距离平皿边缘约15mm。作标记:青、链、庆。,夹取相应的药物纸片,平贴在已设定的位置上,按压,最后镊子火焰灭菌。37℃18~24小时培养,观察结果。,分试验与对照